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更新时间:2024-11-05
人气管成纤维细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
气管 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 成纤维细胞样 | YS-01X8302 |
细胞简介:
人气管成纤维分离自气管组织;气管(Trachea),呼吸器官的一部分;为后壁略平的圆筒型管状。上端平第六颈椎下缘,与环状软骨相连;向下至第四、五胸椎体(相当胸骨角平面)交界处,分左、右主支气管,分叉处称为气管杈。气管主要由14-16个半环状软骨构成,有弹性,软骨为“C"字形的软骨环,缺口向后,各软骨环以韧带连接起来,环后方缺口处由平滑肌和致密结缔组织连接,保持了持续张开状态。管腔衬以粘膜,表面覆盖纤毛上皮,粘膜分泌的粘液可粘附吸入空气中的灰尘颗粒,纤毛不断向咽部摆动将粘液与灰尘排出,以净化吸入的气体。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的支气管成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。气管成纤维细胞在生理条件下的主要功能包括:构造和维持组织的正常形态,合成和释放细胞外基质以及组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。
方法简介:
实验室分离的人气管成纤维采用胶原酶 - 联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的人气管成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传3-5代左右
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
人气管成纤维体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
兔组织因子 英文名称: Rabbit Tissue Factor 规格: 英文缩写: TF
兔组织金属蛋白酶抑制因子1 英文名称: Rabbit Tissue Inhibitor of Metalloproteinases 1 规格: 英文缩写: TIMP-1
兔合酶 英文名称: Rabbit Total Niic Oxide Syhase 规格: 英文缩写: T-NOS
γ干扰素 英文名称: Rabbit γ Ierferon 规格: 英文缩写: IFN-γ
小鼠补体因子H(CFH)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human glycogen syhase kinase (GSK) ELISA Kit 人糖原合成酶激酶(GSK)试剂盒
HumanAialNaiureticPeptide,ANPELISAKit 人心肽(ANP)试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanB-LymphocyteChemoatacta1,BLC-1试剂盒人B-淋巴细胞趋化因子1(BLC-1/CXCL13)试剂盒规格:96T/48T
植物总淀粉化学比色法定量试剂盒20次
HumanSomelysin-2,ST2ELISAKit人基质裂解素(ST2)试剂盒规格:96T/48T
LIM结构域结合蛋白3抗体
丝/苏蛋白激酶ATR抗体
LAYN重组大鼠 Layilin / LAYN 蛋白 Protein
CTGF (connective tissue growth factor 0.5mgCTGF (connective tissue growth factor) 结缔组织生长因子(多肽抗原)
CIB2重组人 CIB2 / KIP-2 蛋白 Protein
FTL Protein Human 重组人 FTL / ferritin, light polypeptide 蛋白
IL11RA Protein Mouse 重组小鼠 IL11RA / IL11Rα 蛋白
CTGF (connective tissue growth factor 0.5mgCTGF (connective tissue growth factor) 结缔组织生长因子(多肽抗原)
FTL Protein Human 重组人 FTL / ferritin, light polypeptide 蛋白
LAYN重组大鼠 Layilin / LAYN 蛋白 Protein
IL11RA Protein Mouse 重组小鼠 IL11RA / IL11Rα 蛋白
CIB2重组人 CIB2 / KIP-2 蛋白 Protein
人气管成纤维细胞大鼠艾杜糖酯酶(IDS)试剂盒 ,英文名: IDS ELISA Kit
Mouse compleme fragme 3A (C3a) ELISA Kit 小鼠补体片断3a(C3a)试剂盒
ELISA 小鼠M-能受体结合力(mouse MCBC) 进口分装
CLIAKitforIL-2(HumanIerleukin2)ELISAkit人白介素2
通用型科萨基病毒A(CoxsackievirusA)定性试剂盒20次
ELISAKitTSP-1大鼠血小板反应蛋白/敏感蛋白1
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行