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更新时间:2024-11-05
人牙龈上皮细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
牙龈 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 上皮细胞样 | YS-01X8309 |
细胞简介:
人牙龈上皮分离自牙龈组织;牙龈是附着在牙颈和牙槽突部分的粘膜组织,呈粉红色、有光泽、质坚韧。牙龈边缘称为龈缘,正常呈月芽形。龈缘与牙颈之间的小沟称龈沟。两邻牙之间的牙龈突起称龈乳突。也叫齿龈,通称牙床;是指包住齿颈的黏膜组织,粉红色,内有很多血管和神经。牙龈上皮长期被认为是抵御口腔中持续存在的细菌的被动免疫屏障,随着对牙周致病菌的不断认识,发现牙龈上皮不仅仅是抵御微生物的物理屏障,上皮细胞还可以分泌抗菌多肽,参与先天性免疫。牙龈上皮作为牙周组织的道屏障,在抵御牙周炎细菌入侵的过程中发挥了重要作用,建立正常牙龈上皮细胞体外培养体系,将为各种牙龈上皮相关的研究提供稳定的实验模型。
方法简介:
实验室分离的人牙龈上皮采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的人牙龈上皮经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件:鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:上皮细胞样
传代特性:可传2-3代
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
人牙龈上皮体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
猪可溶性P选择素(sP-Selectin)ELISAKit ELISA.
猪白介素17(IL-17)ELISAKit ELISA.
猪髓0脂碱性蛋白(MBP)ELISAKit ELISA.
猪生长激素释放多肽(GHRP)ELISAKit ELISA.
猪免疫球蛋白A(IgA)ELISA 试剂盒
Human connexin (Cx) ELISA Kit 人间隙连接蛋白(Cx)试剂盒
PorcineprocollagenⅢN-terminalpeptide,PⅢELISAKit 猪Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢ)试剂盒 进口分装
CLIAKitforAMBP(Humanalpha-1-microglobulin/bikuninprecursor)ELISAKit人α1微球蛋白/bikunin前体
血液胱(cystine)含量高效液相色谱法定量试剂盒20次
Porcineadiponectin,ADPELISAKit猪脂联素(ADP)试剂盒
NK细胞受体2D(CD314)抗体
碳酸酐酶1抗体
CD200R4重组小鼠 CD200R4 / CD200 Receptor 4 / CD200RLa 蛋白 Protein
Cardiac Troponin T 心肌特异性肌钙蛋白T 0.5mgCardiac Troponin T 心肌特异性肌钙蛋白T
ADCYAP1R1重组人 ADCYAP1R1 蛋白 Protein
APP Protein Human 重组人 Beta-amyloid 42 / Beta-APP42 蛋白 (His & GST 标签)
PROM1 Protein Rat 重组大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 蛋白 (His 标签)
Cardiac Troponin T 心肌特异性肌钙蛋白T 0.5mgCardiac Troponin T 心肌特异性肌钙蛋白T
APP Protein Human 重组人 Beta-amyloid 42 / Beta-APP42 蛋白 (His & GST 标签)
CD200R4重组小鼠 CD200R4 / CD200 Receptor 4 / CD200RLa 蛋白 Protein
PROM1 Protein Rat 重组大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 蛋白 (His 标签)
ADCYAP1R1重组人 ADCYAP1R1 蛋白 Protein
人牙龈上皮细胞大鼠γ基(GABA)试剂盒 ,英文名: GABA ELISA Kit
Rabbit soluble iercellular adhesion molecule 1 (sICAM-1) ELISA Kit 兔子可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)试剂盒
ELISA 小鼠基质金属蛋白酶-3(mouse MMP-3) 进口分装
CLIAKitforIL-16(MouseIerleukin16)ELISAKit小鼠白介素16
通用型亮(leucine)含量高效液相色谱法定量试剂盒20次
VWF大鼠血管性血友病因子/瑞斯托辅因子
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行
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