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更新时间:2024-11-05
兔颌骨成纤维细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
颌骨 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 成纤维细胞样 | YS-01X8365 |
细胞简介:
兔颌骨成纤维分离自颌骨组织;颌骨,是指颌部的骨头,分为上颌骨和下颌骨。构成口腔上下部的骨头和肌肉组织,上部叫上颌,下部叫下颌。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
实验室分离的兔颌骨成纤维采用-胶原酶混合酶消化后差速贴壁制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的兔颌骨成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传5代左右;3代以内状态佳
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
兔颌骨成纤维体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
小鼠8异前列腺素试剂盒 小鼠8异前列腺素试剂盒 小鼠8异前列腺素试剂盒,,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠8异前列腺素试剂盒、小鼠8异前列腺素eisa试剂盒
小鼠8羟基脱氧鸟苷试剂盒 小鼠8羟基脱氧鸟苷试剂盒 小鼠8羟基脱氧鸟苷试剂盒,,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠8羟基脱氧鸟苷试剂盒、小鼠8羟基脱氧鸟苷eisa试剂盒
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胰岛素受体β抗体
PE标记人CD45RO单克隆抗体
S100A9重组小鼠 S100A9 / CAGB / p14 蛋白 (His 标签) Protein
次0酸核糖基转移酶1(HPRT1)重组蛋白 Recombinant Hypoxanthine Phosphoribosyltransferase 1 (HPRT1)
ALOX15B重组人 ALOX15B / 15 Lipoxygenase 2 蛋白 Protein
FCGR2A Protein Human 重组人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His & AVI 标签)
IFNA僀Ꝙ僀
ADAMTS7 peptide/HRP 辣根过氧化物酶标记整合素样金属蛋白酶与1型-7抗原 1mgADAMTS7 peptide/HRP 辣根过氧化物酶标记整合素样金属蛋白酶与1型-7抗原
FCGR2A Protein Human 重组人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His & AVI 标签)
FCGR2重组小鼠 CD32 / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 标签), Biotinylated Protein
CD14 Protein Rat 重组大鼠 CD14 蛋白
TFAP2C重组人 TFAP2C / AP2-GAMMA 蛋白 (His 标签) Protein
小鼠干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)ELISA 试剂盒
Human aquaporin 2 (AQP-2) ELISA Kit 人水通道蛋白2(AQP-2)试剂盒
Humancholesterolesteransferprotein,CETPELISAKit 人酯转移蛋白(CETP)试剂盒分装
Humanapelin13,AP13试剂盒人apelin13(AP13)试剂盒
植物氧化应激活性氧(ROS)荧光测定试剂盒(次氯酸离子)20次
Humaotalprostatespecificaigen,tPSAELISAKit人总前列腺特异抗原(tPSA)试剂盒
兔颌骨成纤维细胞大鼠髓细胞触发受体1(EM1)试剂盒 ,英文名: EM1 ELISA Kit
Mouse glycogen phosphorylase BB (GP-BB) ELISA Kit 小鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)试剂盒
ratprolactin,PRLELISAKit 大鼠催乳素(PRL)试剂盒分装
CLIAKitforHIV(Humanai-immunodeficiencyvirusaibody)ELISAKit人抗人类免疫缺陷病毒抗体
细胞PYK2激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次
ELISAKit5-HT大鼠5羟色胺
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