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更新时间:2024-11-04
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产品名称:小鼠胚胎干细胞
组织来源:囊胚
产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
培养信息:
包被条件 明胶(0.1%)
培养基 含LIF、BMP、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次;
生长特性 贴壁
细胞形态 短梭形、多角形
传代特性 可传5-8代左右
消化液 0.025%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:
小鼠胚胎干分离自囊胚胚胎组织;胚胎干细胞(Embryonic stem cell,ESCs,简称ES、EK或ESC细胞)是早期胚胎(原肠胚期之前)或原始性腺中分离出来的一类细胞,它具有体外培养无限增殖、自我更新和多向分化的特性。无论在体外还是体内环境,ES细胞都能被诱导分化为机体几乎所有的细胞类型。进一步说,胚胎干细胞(ES细胞)是一种高度未分化细胞。它具有发育的全能性,能分化出成体动物的所有组织和器官,包括生殖细胞。ES细胞具有与早期胚胎细胞相似的形态结构,细胞核大,有一个或几个核仁,胞核中多为常染色质,胞质胞浆少,结构简单。体外培养时,细胞排列紧密,呈集落状生长。用碱性磷酸酶染色,ES细胞呈棕红色,而周围的成纤维细胞呈淡黄色。细胞克隆和周围存在明显界限,形成的克隆细胞彼此界限不清,细胞表面有折光较强的脂状小滴。细胞克隆形态多样,多数呈岛状或巢状。小鼠ES细胞的直径7 微米~18 微米,猪、牛、羊ES细胞的颜色较深,直径12 微米~18 微米。胚胎干细胞与普通细胞有显著差别,有其特定的生长特性和特定的标志,例如碱性磷酸酶活性非常高,带有胚胎阶段特异性表面抗原( Stage- specific embryonic antigens,SSEA),人类胚胎干细胞还带有高分子量的糖蛋白TRA1-60、TRA-1-81等标志,这些特性和标志均可以用于对胚胎干细胞进行鉴定,除此之外,胚胎干细胞还可以在体外传代,并保持正常核型。在体外培养体系中加入分化抑制剂如白血病抑制因子( Leukaemia inhibitory factor,LF)或者在小鼠胚胎成纤维细胞饲养层(MEF)上培养时,胚胎干细胞都能呈克隆性增殖,长期保持核型正常和稳定,冻存解冻也不影响不分化的特性。另外,胚胎干细胞还表现岀高水平端粒酶活性,目前证明端粒酶与细胞衰老密切相关,多数成熟细胞的端粒酶活性都很低。这些都是胚胎干细胞与成熟细胞不同的重要特点,也可能是其复制生命期限远比体细胞长的原因。
方法简介:
公司实验室分离的小鼠胚胎干采用分离囊胚组织,去除胚胎透明带、使用特制专用培养基筛选培养,消化传代纯化制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的小鼠胚胎干经Oct-4免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养步骤:
一、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a)、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b)、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的产品:
小鼠胰岛细胞抗体试剂盒 小鼠胰岛细胞抗体试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠胰岛细胞抗体试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠胰岛细胞抗体试剂盒、小鼠胰岛细胞抗体试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠血小板膜糖蛋白试剂盒 小鼠血小板膜糖蛋白试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠血小板膜糖蛋白试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠血小板膜糖蛋白试剂盒、小鼠血小板膜糖蛋白试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠血管生成素试剂盒 小鼠血管生成素试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠血管生成素试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠血管生成素试剂盒、小鼠血管生成素试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠血管内皮细胞粘附分子试剂盒 小鼠血管内皮细胞粘附分子试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠血管内皮细胞粘附分子试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠血管内皮细胞粘附分子试剂盒、小鼠血管内皮细胞粘附分子试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠血管舒缓激肽(BK)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human leukocyte aigen G (HLA-G) ELISA Kit 人类白细胞抗原G(HLA-G)试剂盒
Humaniduronatesulfatase,IDSELISAKit 人艾杜糖硫酸酯酶(IDS)试剂盒 96T/48T 进口分装
抗抗体IgG(间接法二步法)
优球蛋白溶解时间(ELT)试剂盒20次
MouseIerleukin1receptoraagonist,IL-1raELISAKit小鼠白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)试剂盒规格:96T/48T
INT11蛋白抗体
E3泛素连接酶MUL1抗体
S100A1重组人 S100A1 蛋白 Protein
血小板反应蛋白(THBS1)重组蛋白 Recombinant Thrombospondin 1 (THBS1)
HA重组甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
CD3E Protein Human 重组人 CD3e / CD3 epsilon 蛋白
GLYCOPROTEIN Protein Sudan ebolavirus 重组苏丹埃博拉病毒 Glycoprotein / GP 蛋白
血小板反应蛋白(THBS1)重组蛋白 Recombinant Thrombospondin 1 (THBS1)
CD3E Protein Human 重组人 CD3e / CD3 epsilon 蛋白
S100A1重组人 S100A1 蛋白 Protein
GLYCOPROTEIN Protein Sudan ebolavirus 重组苏丹埃博拉病毒 Glycoprotein / GP 蛋白
HA重组甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
小鼠胚胎干细胞大鼠钙调0酸酶(CaN)试剂盒 ,英文名: CaN ELISA Kit
Porcine cholecystokinin / cholecystokinin (CCK) ELISA Kit 猪胆囊收缩素/肠促肽(CCK)试剂盒
转基因植物NPTⅡ基因核酸试剂盒 48T
CLIAKitforMCP-2/CCL8ELISAKit大鼠单核细胞趋化蛋白2
体液血管紧张素Ⅰ转化酶(ACE)总活性比色法定量试剂盒20次
ELISAKitP27猫p27核心抗原
收到细胞如何处理?
1、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作