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更新时间:2024-11-04
兔椎间盘纤维环细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
椎间盘组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7132 |
细胞简介:
兔椎间盘纤维环分离自椎间盘组织;椎间盘是位于脊柱两椎体之间,由软骨板、纤维环、髓核组成的一个密封体。上下有软骨板,是透明软骨复盖于椎体上,下面骺环中间的骨面。上下的软骨板与纤维环一起将髓核密封起来。纤维环由胶原纤维束的纤维软骨构成,位于髓核的四周。纤维环的纤维束相互斜行交叉重叠,使纤维环成为坚实的组织,能承受较大的弯曲和扭转负荷。纤维环的前侧及两侧较厚,而后侧较薄。纤维环的前部有强大的前纵韧带,后侧的后纵韧带较窄、较薄。纤维环细胞密度为9000个细胞/mm3,其外层的细胞呈梭型,主要属于纤维细胞,内层细胞呈圆形,主要属于软骨细胞。在培养的情况下,用透射电镜观察则有许多共同的超微结构表现,它们的核较圆,核仁较明显。细胞质内可见大量的附有核糖体颗粒的粗面内质网和滑面内质网。细胞质内线粒体多,为椭圆形,有的可看到双层单位膜,由单位膜包绕初级深酶体和次级深酶体。细胞质内有一系列的扁平囊及小泡主成的高尔基复合体和分泌颗粒,纤维环细胞合成分泌蛋白多糖及胶原纤维的能力很旺盛,保证纤维环生理代谢活动所需的构造物质的供给。一但这种供给减少,纤维环的生物性能就会减弱,椎间盘开始退变。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
公司实验室分离的兔椎间盘纤维环采用胶原酶-联合消化法并结合软骨细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的兔椎间盘纤维环经Ⅰ型胶原蛋白免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 梭形、多角形
传代特性 可传5代左右;3代以内状态优良
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
猪免疫球蛋白E(IgE)试剂盒 试剂盒 组装/原装
猪免疫球蛋白A(IgA)试剂盒 试剂盒 组装/原装
猪流行性腹泻病毒抗体(PEDV)试剂盒 试剂盒 组装/原装
猪0酸化细胞外信号调节激酶(pERK)试剂盒 试剂盒 组装/原装
猪内皮型合酶(eNOS)试剂盒
Human thyroid peroxidase (TPO) ELISA Kit 人甲状腺过氧化物酶(TPO)试剂盒
GuineapigTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKit 豚鼠坏死因子α(TNF-α)试剂盒 进口分装
CLIAKitforAmylin(MouseAmylin)ELISAKit小鼠胰淀素
血液S转移酶(GSHST)总活酶动力性比色法定量试剂盒20次
PorcineB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2ELISAKit猪B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)试剂盒
FITC标记人CD11c单克隆抗体
酸性线粒体肌酸激酶抗体
CLEC4F重组大鼠 CLEC4F / CLECSF13 蛋白 Protein
Dynamin 2(Anti-Human Dynamin-2 0.5mgDynamin 2(Anti-Human Dynamin-2 ) 鸟苷三0酸酶-发动蛋白2抗体
BLNK重组人 BLNK / Ly-57 / SLP-65 蛋白 (His 标签) Protein
ASGR1 Protein Human 重组人 ASGPR1 / ASGR1 蛋白 (His 标签)
TIMP1 Protein Mouse 重组小鼠 TIMP1 / TIMP / CLGI 蛋白
Dynamin 2(Anti-Human Dynamin-2 0.5mgDynamin 2(Anti-Human Dynamin-2 ) 鸟苷三0酸酶-发动蛋白2抗体
ASGR1 Protein Human 重组人 ASGPR1 / ASGR1 蛋白 (His 标签)
CLEC4F重组大鼠 CLEC4F / CLECSF13 蛋白 Protein
TIMP1 Protein Mouse 重组小鼠 TIMP1 / TIMP / CLGI 蛋白
BLNK重组人 BLNK / Ly-57 / SLP-65 蛋白 (His 标签) Protein
兔椎间盘纤维环细胞大鼠活化素A受体抗体IgM(ACV-RAb IgM)试剂盒 ,英文名: ACV-RAb IgM ELISA Kit
Rabbit pyridinium crosslinks (PY) ELISA Kit 兔交联物(PY)试剂盒
杆菌(BA)核酸试剂盒 48T
CLIAKitforMousepituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide,PACAPELISAKit小鼠垂体腺苷酸环化酶激活肽
体液元素荧光定量试剂盒20次
ELISAKitPⅢNP人Ⅲ型前胶原肽