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更新时间:2024-11-04
兔胰岛细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
胰腺 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7875 |
细胞简介:
兔胰岛分离自胰腺组织;胰腺分为外分泌腺和内分泌腺两部分。外分泌腺由腺泡和腺管组成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、原、脂肪酶、等。胰液通过胰腺管排入十二指肠,有消化蛋白质、脂肪和糖的作用。内分泌腺由大小不同的细胞团──胰岛所组成,胰岛主要由4种细胞组成:α细胞、β细胞、γ细胞及PP细胞。α细胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β细胞分泌胰岛素,降低血糖;γ细胞分泌,以旁分泌的方式抑制α、β细胞的分泌;PP细胞分泌胰多肽,抑制胃肠运动、胰液分泌和胆囊收缩。胰岛细胞作为糖尿病新药的细胞筛选模型需保持其结构完整、生理功能稳定和足够长的存活时间。胰岛占胰腺总质量的1%-2%,每个胰岛大概含有1000个细胞。胰岛移植可消除常规治疗产生的严重低血糖症状,具有创伤小及并发症少等优点,是最有前景的Ⅰ型糖尿病治疗方案。移植胰岛的获得需经过供体筛选、胰腺消化、胰岛分离纯化及结果鉴定等步骤,分离纯化效果取决于原料及操作方法的选择。
方法简介:
实验室分离的兔胰岛采用胶原酶灌注消化法结合密度梯度离心法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的兔胰岛经DTZ染色检测,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:梭形、多角形
传代特性:可传1-2代
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
兔胰岛体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的优良培养状态。
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
鸭病毒性肠病毒(DEV)试剂盒 96T/48T
鸭白介素8(IL-8/CXCL8)试剂盒 96T/48T
鸭白介素6(IL-6)试剂盒 96T/48T
鸭白介素4(IL-4)试剂盒 96T/48T
小鼠转铁蛋白受体(TFR/CD71)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human ai zona pellucida aibody (aZP) ELISA Kit 人抗透明带抗体(aZP)试剂盒
Humanγ-glamylsysteinesyhetase,γ-ECSELISAKit 人γ谷氨酰半胱合成酶(γ-ECS)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforACA-IgM(Mouseai-cardiolipinaibodyIgM)ELISAKit小鼠抗心0脂抗体IgM
药品糖精(saccharin)含量红外光谱法定量试剂盒20次
Mouseoxytocin,OTELISAKit小鼠催产素(OT)试剂盒规格:96T/48T
DNA交联修复蛋白1C抗体
生物钟蛋白3抗体
ACE2重组食蟹猴 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 (Fc 标签) Protein
LH/CG Receptor(Luteinizing Hormone/Choriogonadotropin Receptor 0.5mgLH/CG Receptor(Luteinizing Hormone/Choriogonadotropin Receptor) 人促黄体生成素受体抗原
RTN4重组人 RTN4 / NOGO-A 蛋白 (GST 标签) Protein
CASQ1 Protein Human 重组人 Calsequestrin-1 / CASQ1 蛋白
CTSS Protein Mouse 重组小鼠 Cathepsin S / CTSS 蛋白
LH/CG Receptor(Luteinizing Hormone/Choriogonadotropin Receptor 0.5mgLH/CG Receptor(Luteinizing Hormone/Choriogonadotropin Receptor) 人促黄体生成素受体抗原
CASQ1 Protein Human 重组人 Calsequestrin-1 / CASQ1 蛋白
ACE2重组食蟹猴 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 (Fc 标签) Protein
CTSS Protein Mouse 重组小鼠 Cathepsin S / CTSS 蛋白
RTN4重组人 RTN4 / NOGO-A 蛋白 (GST 标签) Protein
兔胰岛细胞大鼠肌红蛋白(MB)试剂盒 ,英文名: MB ELISA Kit
Rabbit 6 keto prostaglandin F1a (6-keto-PGF1a) ELISA Kit 兔6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)试剂盒
对虾皮下和造血器官坏死病毒(HHNV)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
CLIAKitforMouseoponi,Tn-TELISAKit小鼠肌钙蛋白T
体液钙蛋白酶(CALPAIN)活性荧光定量试剂盒20次
ELISAKit8-OHdG人8羟基脱氧鸟苷
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行