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更新时间:2024-11-04
兔牙周膜干细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
牙周膜 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 成纤维细胞样 | YS-01X7970 |
细胞简介:
兔牙周膜干分离自牙周膜组织;牙周膜(牙周韧带、牙周间隙)是由致密结缔组织所构成。多数纤维排列成束,纤维的一端埋于牙骨质内,另一端则埋于牙槽窝骨壁里,使牙齿固位于牙槽窝内;牙周膜内有神经、血管、淋巴和上皮细胞等。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)来源于胚胎时期的中胚层组织,具有很强的自我复制和多向分化潜能,具有向脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞及肌细胞等多种终末细胞定向分化的能力,运用 MSCs来修复软骨损伤具有很好的应用前景,目前已能够从骨髓、脂肪、滑膜、骨骼、肌肉等组织以及羊水、脐带、脐带血中分离和制备间充质干细胞。牙周膜干细胞参与了牙周组织的病变、修复及再生过程。现在,利用牙周膜干细胞建立体外模型,已经成为有关员研究牙周组织疾病的重要手段。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
实验室分离的兔牙周膜干采用胶原酶消化结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的兔牙周膜干经CD44免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基:含FBS、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传3代左右
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
兔牙周膜干体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的优良培养状态。
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
小鼠前列腺素F(PGF)试剂盒 96T/48T
小鼠前列腺素E2(PGE2)试剂盒 96T/48T
小鼠前列腺素E1(PGE1)试剂盒 96T/48T
小鼠迁移率族蛋白B1(HMGB-1)试剂盒 96T/48T
小鼠神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human membrane cofactor protein (MCP/CD46) ELISA Kit 人膜辅蛋白(MCP/CD46)试剂盒
Humanlow-densitylipoprotein-receptor-relatedprotein,LRP-6ELISAKit 人低密度脂蛋白受体相关蛋白6(LRP-6)试剂盒 96T/48T 进口分装
Goatgrowthhormonereleasinghormone,GHRH试剂盒山羊促生长激素释放激素(GHRH)试剂盒规格:96T/48T
真菌/酵母琥珀酸脱氢酶(SDH)活性比色法定量试剂盒20次
MouseCollageypeⅠ,ColⅠELISAKit小鼠Ⅰ型胶原(ColⅠ)试剂盒规格:96T/48T
cGMP依赖性蛋白激酶1抗体
神经调节蛋白4抗体
SELPLG重组小鼠 PSGL-1 / CD162 / SELPLG 蛋白 (Fc 标签) Protein
MARCKS相关蛋白(MARCKSL1)重组蛋白 Recombinant MARCKS Related Protein (MARCKSL1)
SCN2B重组人 SCN2B 蛋白 (Fc 标签) Protein
COL2A1 Protein Human 重组人 COL2A1 蛋白 (aa 1242-1487, His 标签)
食蟹猴
MARCKS相关蛋白(MARCKSL1)重组蛋白 Recombinant MARCKS Related Protein (MARCKSL1)
COL2A1 Protein Human 重组人 COL2A1 蛋白 (aa 1242-1487, His 标签)
SELPLG重组小鼠 PSGL-1 / CD162 / SELPLG 蛋白 (Fc 标签) Protein
食蟹猴
SCN2B重组人 SCN2B 蛋白 (Fc 标签) Protein
兔牙周膜干细胞大鼠肌肉0酸果糖激酶(PFKM)试剂盒 ,英文名: PFKM ELISA Kit
Mouse tissue type plasminogen activator (t-PA) ELISA Kit 小鼠组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)试剂盒
RatDopamineD1receptor,D1RELISAKit 大鼠多巴胺D1受体(D1R)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforFVIII-AgELISAKit大鼠Ⅷ相关抗原
细胞科萨基病毒A(CoxsackievirusA)定量PCR扩增试剂盒20次
RatMethemoglobin,MHBELISAKit大鼠高铁血红蛋白(MHB)试剂盒规格:96T/48T