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更新时间:2024-11-04
兔视网膜色素上皮细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
视网膜组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 上皮细胞样 | YS-01X7009 |
细胞简介:
兔视网膜色素上皮分离自视网膜组织;视网膜居于眼球壁的内层,是一层透明的薄膜。视网膜由色素上皮层和视网膜感觉层组成,两层间在病理情况下可分开,称为视网膜脱离。色素上皮层与脉络膜紧密相连,由色素上皮细胞组成,它们具有支持和营养光感受器细胞、遮光、散热以及再生和修复等作用。组织学上视网膜分为10层,由外向内分别为:色素上皮层、视锥、视杆细胞层、外界膜、外颗粒层、外丛状层、内颗粒层、内丛状层、神经节细胞层、神经纤维层、内界膜。视网膜内层为衬于血管膜内面的一层薄膜,有感光作用;后部鼻侧有一视神经乳头。视网膜上的感觉层是由三个神经元组成。神经元是视细胞层,专司感光,它包括锥细胞和杆细胞。视杆细胞主要在离中心凹较远的视网膜上,而视锥细胞则在中心凹处最多。层叫双节细胞,约有10到数百个视细胞通过双节细胞与一个神经节细胞相联系,负责联络作用。第三层叫节细胞层,专管传导。视网膜是一层菲薄的但又非常复杂的结构,它贴于眼球的后壁部,传递来自视网膜感受器冲动的神经纤维跨越视网膜表面,经由视神经到达出口。视网膜的分辨力是不均匀的,在黄斑区,其分辨能力。视网膜色素上皮(RPE)位于脉络膜和光感受器细胞外节之间,是视网膜下腔和脉络膜血管之间的离子、水、营养物质和代谢终产物转运通道;主要是由单层色素上皮细胞所构成,排列十分规则。视网膜色素上皮参与循环,吞噬脱落的光感受器细胞外节以维持光感受器细胞兴奋性,并分泌多种生长因子,帮助维持脉络膜血管内皮细胞和光感受器细胞的结构完整性。细胞呈多角形,细胞分为三部分,即顶部、体部和基底部。视网膜色素上皮细胞无再生能力,细胞死亡后不被替换,而是邻近的细胞向侧面滑动,以填补死亡细胞遗留下来的空间。视网膜色素上皮位于脉络膜和光感受器细胞外节之间,是视网膜下腔和脉络膜血管之间的离子、水、营养物质和代谢终产物转运通道。视网膜色素上皮参与循环,吞噬脱落的光感受器细胞外节以维持光感受器细胞兴奋性,并分泌多种生长因子,帮助维持脉络膜血管内皮细胞和光感受器细胞的结构完整性。
方法简介:
公司实验室分离的兔视网膜色素上皮采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的兔视网膜色素上皮经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
小鼠牙本质涎0蛋白 英文名称: Mouse Dein Sialophosphoprotein 规格: 英文缩写: DSP
小鼠DNA抗体 英文名称: Mouse Deoxyribonucleic Acid Aibody 规格: 英文缩写: DNA.Ab
小鼠氧化酶 英文名称: Mouse Diamine Oxidase 规格: 英文缩写: DAO
小鼠多巴胺受体D1 英文名称: Mouse Dopamine receptor D1 规格: 英文缩写: DRD1
小鼠血管内皮细胞生长因子B(VEGF-B)ELISA 试剂盒 96T/48T
Rat calmodulin (CAM) ELISA Kit 大鼠钙调素(CAM)试剂盒
Humanverylateappearingaigen,VLAELISAKit 人迟现抗原(VLA)试剂盒 96T/48T 进口分装
C3试剂盒鲑鱼补体蛋白3规格:96T/48T
鱼类受精卵细胞冻存试剂盒(低温)50次
MouseInsulin,INSELISAKit小鼠胰岛素(INS)试剂盒规格:96T/48T
6号染色体开放阅读框72抗体
气味结合蛋白2A抗体
HA重组甲型流感 H5N1 (A/chicken/VietNam/NCVD-016/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
PACAP-38 腺苷酸环化酶激活肽-38(抗原 0.5mgPACAP-38 腺苷酸环化酶激活肽-38(抗原)
MANF重组人 MANF / ARMET 蛋白 Protein
CD47 Protein Human 重组人 CD47 蛋白 (Fc 标签)
ACVR1 Protein Human 重组人 ALK-2 / ACVR1 蛋白 (His & Fc 标签)
PACAP-38 腺苷酸环化酶激活肽-38(抗原 0.5mgPACAP-38 腺苷酸环化酶激活肽-38(抗原)
CD47 Protein Human 重组人 CD47 蛋白 (Fc 标签)
HA重组甲型流感 H5N1 (A/chicken/VietNam/NCVD-016/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
ACVR1 Protein Human 重组人 ALK-2 / ACVR1 蛋白 (His & Fc 标签)
MANF重组人 MANF / ARMET 蛋白 Protein
兔视网膜色素上皮细胞大鼠降解产物(FDP)试剂盒 ,英文名: FDP ELISA Kit
Pla zeatin riboside (ZR) ELISA Kit 植物玉米素核苷(ZR)试剂盒
Mousemacrophageinflammatoryprotein5,MIP-5ELISAKit 小鼠巨噬细胞性蛋白5(MIP-5)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHumanadvancedglycationendproducts,AGEsELISAKit人晚期糖基化终末产物
细胞HPV6(HUMANPAPILLOMAVIRUS-6)病毒定量PCR扩增试剂盒20次
ELISAKitC3a大鼠补体片断3a
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行
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