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更新时间:2024-11-04
兔脐带间充质干细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
脐带组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 成纤维细胞样 | YS-01X7167 |
细胞简介:
兔脐带间充质干分离自脐带;脐带是哺乳类的连接胎儿和胎盘的管状结构。原来是由羊膜包卷着卵黄囊和尿膜的柄状伸长部而形成的。脐带中通过尿膜的血管即脐动脉和脐静脉,卵黄囊的血管即脐肠系膜动脉及脐肠系膜静脉。当卵黄囊及其血管退化,脐动脉和脐静脉就发达起来,在这些间隙中可以看到疏松的胶状的间充质。在子宫中,子宫动脉在胎盘的母体部分出的毛细血管,与胎盘的子体部胎儿毛细血管靠近,在此处母体和胎儿的血液间进行CO2和O2,代谢产物即代谢废物和营养物质的交换。脐动脉将胎儿来的废物运送至胎盘,脐静脉将O2和营养物质从胎盘运送给胎儿。最后由子宫静脉将来自胎儿的代谢废物运走,某种激素和抗体等也通过脐带从母体移交给胎儿。脐带中含有大量的干细胞,干细胞是生命的种子,它会分化成机体的各种细胞,结出各种不同的果实——血液细胞、神经细胞、骨骼细胞等。干细胞是具有自我更新、高度增殖和多项分化潜能的细胞群体;这些细胞可以通过分裂维持自身细胞的特性和数量,又可进一步分化为各种组织细胞,从而在组织修复等方面发挥积极作用。间充质干细胞(MSC)是一种具有高度自我更新和多向分化潜能的干细胞。在不同的诱导条件下,可分化为多种造血细胞以外的组织细胞,并具有造血支持、免疫调节、组织修复等作用;目前,多用于风湿免疫疾病的治疗。间充质干细胞(MSCs)是一种具有自我更新和多向分化潜能的成体干细胞,存在于骨髓、脂肪组织、脐血及多种胎儿组织。它可分泌多种细胞因子及生长因子,促进造血干细胞(HSC)的增殖与分化。MSCs还具有免疫调节、抗炎和组织修复作用,可减轻移植物抗宿主病(GVHD)及其他移植相关并发症。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
公司实验室分离的兔脐带间充质干采用组织贴块法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的兔脐带间充质干经CD90免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传3-5代左右
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
嗜酸性粒细胞趋化因子 (Eotaxin) 作用: ELISA 规格: 96T 美国 Biosource
Human Eotaxin-2/MPIF-2/CCL24 作用: ELISA 规格: 96T 美国 R&D
Human Eotaxin-3/CCL26 作用: ELISA 规格: 96T 美国 R&D
促红细胞生成素 (EPO) 作用: ELISA 规格: 96T 德国 DRG
豚鼠血清(NO)ELISA 试剂盒 96T/48T
Rat signal ansduction molecule 1 (Smad1) ELISA Kit 大鼠信号转导分子1(Smad1)试剂盒
Humanendomorphin-2,EM-2ELISAKit 人内肽-2(EM-2)试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanCryoglobulin,CG试剂盒人冷球蛋白(CG)试剂盒规格:96T/48T
组织D-乳酸比色法定量试剂盒20次
humanProstaglandinD2-methoxime,PGD2-MOXELISAKit人甲肟前列腺素D2(PGD2-MOX)试剂盒规格:96T/48T
巴胺受体D2抗体
磷酸烯醇丙酮酸羧激酶抗体
S100B重组小鼠 S100B / S100beta 蛋白 (Fc 标签) Protein
端粒酶关联蛋白1(TEP1)重组蛋白 Recombinant Telomerase Associated Protein 1 (TEP1)
DDR2重组人 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白 Protein
IGJ Protein Human 重组人 IGJ / Immunoglobulin J chain 蛋白
IL17RA Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IL17RA / IL17R 蛋白 (Fc 标签)
白蛋白(ALB)天然蛋白 Native Albumin (ALB)
IGJ Protein Human 重组人 IGJ / Immunoglobulin J chain 蛋白
TCN2重组小鼠 TCN2 / Transcobalamin-II 蛋白 Protein
IFNA1 Protein Rat 重组大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 蛋白 (Fc 标签)
B3GNT2重组人 B3GNT2 蛋白 (Fc 标签) Protein
兔脐带间充质干细胞大鼠抗酸性0酸酶(ACP5)试剂盒 ,英文名: ACP5 ELISA Kit
Monkey glial fibrillary acidic protein (GFAP) ELISA Kit神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)试剂盒
RaeninELISAKit 大鼠肾素(Renin)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforFree-T3(MouseFreei-iodothyronineIndes)ELISAKit小鼠游离三甲状腺原
细胞活化10(FACTORXa)活性比色法定量试剂盒20次
Ratplaceagrowthfactor,PLGFELISAKit大鼠胎盘生长因子(PLGF)试剂盒规格:96T/48T