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基础信息Product information
产品名称:

人真皮成纤维细胞

产品简介:

人真皮成纤维细胞公司正在出售的产品:kelch样蛋白13抗体 FGD6蛋白抗体 Rsafd1蛋白抗体 人直肠癌组织源细胞 人髓母细胞瘤组织源细胞 RCM-1人直肠癌细胞 293FT (人胚肾细胞)

产品型号:

厂商性质:经销商

访问量:93

更新时间:2024-10-30

产品特性Product characteristics

人真皮成纤维细胞

人真皮成纤维细胞

商品属性:

组织来源

产品规格

细胞形态

货号

皮肤组织

5×105cells/T25细胞培养瓶

成纤维细胞样

YS-01X7340

细胞简介:

人真皮成纤维分离自真皮组织;真皮,位于表皮深层,向下与皮下组织相连,真皮结缔组织的胶原纤维和弹性纤维互相交织在一起,埋于基质内。其内分布着各种结缔组织细胞和大量的胶原纤维弹性纤维,使皮肤既有弹性,又有韧性。其由两层组成——乳头层与网状层。真皮的结构组成是胶原蛋白、弹性纤维以及基质。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的真皮成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。真皮成纤维细胞在生理条件下的主要功能包括:构造和维持组织的正常形态,合成和释放细胞外基质以及组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。

方法简介:

公司实验室分离的人真皮成纤维采用先消化、后-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测:

公司实验室分离的人真皮成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息:

培养基 含FBS、生长添加剂、PenicillinStreptomycin

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右;3代以内状态优良

消化液 0.25%

培养条件 气相:空气,95%CO25%

人真皮成纤维细胞

细胞传代及冻存:

细胞传代步骤细胞冻存步骤
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

原代细胞的培养方法一般有以下4种:

  ① 组织块培养法

  组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

  ② 消化培养法

  ③ 悬浮细胞培养法

  对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

  ④器官培养

  器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。

人真皮成纤维细胞


公司正在出售的产品:

兔可溶性凋亡相关因子(sFAS/Apo-1)试剂盒   96T/48T

兔可溶性P选择素(sP-selectin)试剂盒   96T/48T

兔抗糖蛋白抗体(GP)试剂盒   96T/48T

兔抗平滑肌抗体(ASMA)试剂盒   96T/48T

小鼠L苯解酶(PAL)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat dehydroepiandrosterone S7 (DHEA-S7) ELISA Kit 大鼠脱氢表雄酮S7(DHEA-S7)试剂盒

Humanesogen,EELISAKit 人雌激素(E)试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanCollageype,ColⅢ试剂盒人Ⅲ型胶原(Col)试剂盒规格:96T/48T

组织5-核苷酸酶(5-)活性比色法定量试剂盒20

Humaeceptoyrosinekinase,KsELISAKit人受体酪激酶(Ks)试剂盒规格:96T/48T

CD10抗体

富含脯同源蛋白1抗体

BCL2L1重组小鼠 BCL2L1 / Bcl-XL 蛋白 (aa 1-212, His 标签) Protein

白介素17(IL17)重组蛋白 Recombinant Interleukin 17 (IL17)

GOT1重组人 GOT1 / Aspartate aminotransferase 蛋白 Protein

HMGB1 Protein Human 重组人 HMGB1 / HMG1 蛋白

PROCR Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 Epcr / PROCR 蛋白 (Fc 标签)

P选择素(SELP)重组蛋白 Recombinant Selectin, Platelet (SELP)

HMGB1 Protein Human 重组人 HMGB1 / HMG1 蛋白

ERBB3重组小鼠 HER3 / ErbB3 蛋白 Protein

ALCAM Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD166 / ALCAM 蛋白 (Fc 标签)

APCS重组人 Serum amyloid P component / APCS / SAP 蛋白 Protein

人真皮成纤维细胞大鼠前列腺酸性0酸酶(ACP3)试剂盒 ,英文名: ACP3 ELISA Kit

Mouse angiopoietin receptor Tie1 (ANG-R-Tie1) ELISA Kit 小鼠血管生成素受体Tie1(ANG-R-Tie1)试剂盒

RatCyclin-D2ELISAKit 大鼠细胞周期素D2(Cyclin-D2)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforGRHELISAKit大鼠促生长激素释放激素

细胞单胺氧化酶A(MAO-A)活性比色法定量试剂盒20

RatiggeringReceptorExpressesonMyeloidCells-1,EM-1ELISAKit大鼠髓系细胞触发受体-1(EM-1)试剂盒规格:96T/48T

原代细胞的培养条件:

  一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养

  1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;

  2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;

  3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;

  4、 胎牛血清浓度为10%-80%

  5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;

  6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;

  7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;

  8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。

  二、悬浮细胞培养

  1、原代培养时要尽量去除红细胞;

  2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;

  3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;

  4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;

  5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;

  6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。


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