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更新时间:2024-10-30
人胰腺癌组织源细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
胰腺癌组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7473 |
细胞简介:
人胰腺癌组织源分离自患有胰腺癌病人的胰腺癌组织;胰腺癌是一种恶性程度很高,诊断和治疗都很困难的消化道恶性肿瘤,约90%为起源于腺管上皮的导管腺癌。其发病率和死亡率近年来明显上升。5年生存率<1%,是预后最差的恶性肿瘤之一。胰腺癌早期的确诊率不高,手术死亡率较高,而很低。胰腺癌的病因尚不十分清楚。其发生与吸烟、饮酒、高脂肪和高蛋白饮食、过量饮用咖啡、环境污染及遗传因素有关;近年来的调查报告发现糖尿病人群中胰腺癌的发病率明显高于普通人群;也有人注意到慢性胰腺炎病人与胰腺癌的发病存在一定关系,发现慢性胰腺炎病人发生胰腺癌的比例明显增高;另外还有许多因素与此病的发生有一定关系,如职业、环境、地理等。随着医学技术的进步,大部分癌症的生存率都在提高,例如乳腺癌,结直肠癌等肿瘤,近几十年来,生存率得到了大幅度的提升。但胰腺癌的生存率一直停滞不前,缺乏有效的治疗方法,的死亡率使其成为“王",体外培养胰腺癌组织源细胞对研究胰腺癌的治疗具有重要意义。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
公司实验室分离的癌组织源采用胶原酶消化、经Percoll离心纯化制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人胰腺癌组织源经检测,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 梭形、多角形
传代特性 可传5代左右;3代以内状态优良
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
小鼠试剂盒
小鼠试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠试剂盒、小鼠试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠生长激素释放肽试剂盒 小鼠生长激素释放肽试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠生长激素释放肽试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠生长激素释放肽试剂盒、小鼠生长激素释放肽试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠生长激素释放多肽试剂盒 小鼠生长激素释放多肽试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠生长激素释放多肽试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠生长激素释放多肽试剂盒、小鼠生长激素释放多肽试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠损伤分子试剂盒 小鼠损伤分子试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠损伤分子试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠损伤分子试剂盒、小鼠损伤分子试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA 试剂盒 96T/48T
Rat maix metalloproteinase 1 (MMP-1) ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶1(MMP-1)试剂盒
HumanGuaninenucleotidedissociationInhibitor,GDIELISAKit 人鸟苷酸解离抑制因子(GDI)试剂盒 96T/48T 进口分装
Duckcyclicadenosinemonophosphate,cAMP试剂盒鸭环0酸腺苷(cAMP)试剂盒规格:96T/48T
载玻片细胞组蛋白H3-K4甲基化荧光显微镜试剂盒(针对一甲基)10/20次
MouseD-LactateDehydrogenase,D-LDHELISAKit小鼠D-乳酸脱氢酶(D-LDH)试剂盒规格:96T/48T
ARC1抗体
非活性双特异性磷酸酶抗体27抗体
IL6ST重组小鼠 IL6ST / CD130 蛋白 (His & Fc 标签) Protein
CD33 peptide(human 0.5mgCD33 peptide(human) CD33抗原(人)
VCL重组人 VCL / Vinculin 蛋白 Protein
CLEC1B Protein Human 重组人 CLEC1B / CLEC2 蛋白
IL9 Protein Rat 重组大鼠 IL9 / IL-9 蛋白
CD33 peptide(human 0.5mgCD33 peptide(human) CD33抗原(人)
CLEC1B Protein Human 重组人 CLEC1B / CLEC2 蛋白
IL6ST重组小鼠 IL6ST / CD130 蛋白 (His & Fc 标签) Protein
IL9 Protein Rat 重组大鼠 IL9 / IL-9 蛋白
VCL重组人 VCL / Vinculin 蛋白 Protein
人胰腺癌组织源细胞大鼠热休克蛋白40(HSP40)试剂盒 ,英文名: HSP40 ELISA Kit
Mouse vascular endothelial growth factor receptor -3 (VEGFR-3) ELISA Kit 小鼠血管内皮细胞生长因子受体-3(VEGFR-3)试剂盒
RatPhospholipidaseA2,PL-A2ELISAKit 大鼠0脂酶A2(PL-A2)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforGSTpi(HumanglathioneS-ansferases0ELISAKit人硫转移酶pi基因
细胞超氧化物阴离子比色法定量试剂盒20次
Rattumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand1,AILR1ELISAKit大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1(AIL-R1)试剂盒规格:96T/48T