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更新时间:2024-10-30
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用,不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗!
产品名称:人软骨细胞
组织来源:软骨组织
产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2~3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 梭形、多角形
传代特性 可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:
人软骨分离自软骨组织;软骨组织由软骨细胞、基质及纤维构成。软骨组织再生能力强,这些增生的幼稚细胞形似纤维母细胞,以后逐渐变为软骨母细胞,并形成软骨基质,细胞被埋在软骨陷窝内而变为静止的软骨细胞。根据软骨组织内所含纤维成分的不同,可将软骨分为透明软骨、弹性软骨和纤维软骨三种,其中以透明软骨的分布较广,结构也较典型。软骨细胞(chondrocyte)位于软骨陷窝内。幼稚的软骨细胞位于软骨组织的表层,单个分布,体积较小,呈椭圆形,长轴与软骨表面平行,越向深层的软骨细胞体积之间增大呈圆形,细胞核圆形或卵圆形,染色浅,细胞质弱嗜碱性,常见数量不一的脂滴。成熟的软骨细胞多2-8个成群分布于软骨陷窝内,这些软骨细胞由同一个母细胞分裂增殖而成,称为同源细胞群。电镜下,软骨细胞有突起和皱褶,细胞质内有大量的粗面内质网和发达的高尔基复合体及少量的线粒体。在组织切片中,软骨细胞收缩为不规则形,在软骨囊和细胞之间出现较大的腔隙。体外培养的软骨细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。
方法简介:
公司实验室分离的人软骨采用胶原酶-联合消化制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人软骨经Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养步骤:
一、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a)、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b)、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
收到细胞如何处理?
1、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作
公司正在出售的产品:
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小鼠脂蛋白相关0脂酶试剂盒 小鼠脂蛋白相关0脂酶试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠脂蛋白相关0脂酶试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠脂蛋白相关0脂酶试剂盒、小鼠脂蛋白相关0脂酶eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠铁调素(Hepcidin)试剂盒 96T/48T
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血红蛋白ζ链/Hemoglobin ζ 抗体
Pacific Blue标记人CD57单克隆抗体
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CK18(Cytokeratin 18 0.5mgCK18(Cytokeratin 18) 细胞角蛋白18(多肽)
PARP3重组人 PARP-3 / PARP3 蛋白 (His & GST 标签) Protein
CFL2 Protein Human 重组人 CFL2 / cofilin 2 / ADF 蛋白
VSIG4 Protein Mouse 重组小鼠 VSIG4 蛋白 (His & Fc 标签)
CK18(Cytokeratin 18 0.5mgCK18(Cytokeratin 18) 细胞角蛋白18(多肽)
CFL2 Protein Human 重组人 CFL2 / cofilin 2 / ADF 蛋白
LGMN重组小鼠 Legumain/ LGMN 蛋白 Protein
VSIG4 Protein Mouse 重组小鼠 VSIG4 蛋白 (His & Fc 标签)
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RatDehydroepiandrosteronesulfate,DHEA-SELISAKit 大鼠脱轻表雄酮硫酸酯(DHEA-S)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHMGB-1ELISAKit大鼠高迁移率族蛋白B1
细胞PKCι激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次
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