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更新时间:2024-10-30
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产品名称:人乳腺癌血管周细胞
组织来源:乳腺癌组织
产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞简介:
人乳腺癌血管周分离自乳腺癌组织;女性乳腺是由皮肤、纤维组织、乳腺腺体和脂肪组成的,乳腺癌是发生在乳腺腺上皮组织的恶性肿瘤。乳腺癌中99%发生在女性,男性仅占1%。乳腺并不是维持机体生命活动的重要器官,原位乳腺癌并不致命;但由于乳腺癌细胞丧失了正常细胞的特性,细胞之间连接松散,容易脱落。癌细胞一旦脱落,游离的癌细胞可以随血液或淋巴液播散全身,形成转移,危及生命。目前,乳腺癌已成为威胁女性身心健康的常见肿瘤。周细胞(pericyte)又称Rouget细胞和壁细胞,是一种包围全身毛细血管和静脉中内皮细胞的细胞,可以收缩。周细胞嵌入毛细血管内皮细胞的基膜中,通过物理接触和旁分泌信号与内皮细胞进行细胞通讯,监视和稳定内皮细胞的成熟过程。此外,周细胞还具有调控毛细血管血流量、细胞碎屑清除和吞噬以及血脑屏障渗透性的作用,其多功能性是目前研究的热点之一,所以对血管周细胞的生物学特征、标记物、细胞功能等的研究都为相关研究提供基础资料。周细胞产生手指状的外延以调控毛细血管的血流量。周细胞和内皮细胞之间共同拥有一个基膜,基膜上有多种细胞连接,包括多种整合素、神经钙黏素、纤连蛋白以及接合素。它还参与毛细血管直径的双向调控;毛细血管受损时,周细胞还可增殖,分化为内皮细胞和成纤维细胞。
方法简介:
公司实验室分离的人乳腺癌血管周采用胶原酶-联合消化法及不锈钢网筛过滤法结合密度梯度离心法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人乳腺癌血管周经alpha-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养步骤:
一、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a)、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b)、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
收到细胞如何处理?
1、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作
公司正在出售的产品:
小鼠巯基转移酶(GST)试剂盒 96T/48T
小鼠过氧化酶(GSH-Px)试剂盒 96T/48T
小鼠(GSH)试剂盒 96T/48T
小鼠谷酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)试剂盒 96T/48T
小鼠抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA/TGAB)ELISA 试剂盒 96T/48T
Ai endothelial cell aibodies (AECA) in rat ELISA Kit 大鼠抗内皮细胞抗体(AECA)试剂盒
HumanflagellinELISAKit 人鞭毛蛋白(flagellin)试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanAngiotensinⅡReceptor2,AT2R试剂盒人血管紧张素Ⅱ受体2(AT2R)试剂盒规格:96T/48T
植物甘油-3-0酸脱氢酶(Glycerol-3-PhosphateDehydrogenase)总活性比色法定量试剂盒20次
Humanβ-Thromboglobulin,β-TGELISAKit人β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)试剂盒规格:96T/48T
雄激素受体相关蛋白24抗体
NF-kappa-B抑制子epsilon抗体
CD99L2重组小鼠 CD99L2 / MIC2L1 蛋白 (Fc 标签) Protein
Bad (BCL-xL/BCL-2-associated death promoter 0.5mgBad (BCL-xL/BCL-2-associated death promoter) 相关死亡促进因子Bad抗原
SELM重组人 SELM / Selenoprotein M 蛋白 Protein
DUSP3 Protein Human 重组人 DUSP3 / VHR 蛋白 (His & GST 标签)
TNFSF8 Protein Rat 重组大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 (Fc 标签)
Bad (BCL-xL/BCL-2-associated death promoter 0.5mgBad (BCL-xL/BCL-2-associated death promoter) 相关死亡促进因子Bad抗原
DUSP3 Protein Human 重组人 DUSP3 / VHR 蛋白 (His & GST 标签)
CD99L2重组小鼠 CD99L2 / MIC2L1 蛋白 (Fc 标签) Protein
TNFSF8 Protein Rat 重组大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 (Fc 标签)
SELM重组人 SELM / Selenoprotein M 蛋白 Protein
人乳腺癌血管周细胞大鼠天冬酸转酶(AST)试剂盒 ,英文名: AST ELISA Kit
Mouse myelin basic protein (MBP) ELISA Kit 小鼠髓0脂碱性蛋白(MBP)试剂盒
Rati-iodothyronine,T3ELISAKit 大鼠三甲状腺原(T3)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHO-1ELISAKit大鼠血红素氧合酶1
细胞PKCγ激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次
ELISAKi-proBNP大鼠N端前脑素
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