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更新时间:2024-10-30
人脐动脉平滑肌细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
脐带组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 成纤维细胞样 | YS-01X7299 |
细胞简介:
人脐动脉平滑肌分离自脐带组织;它是脐动脉的重要结构组成细胞之一,在机体的正常生理过程中发挥着重要作用。脐带是哺乳类的连接胎儿和胎盘的管状结构,脐带中通过尿膜的血管即脐动脉和脐静脉,卵黄囊的血管即脐肠系膜动脉及脐肠系膜静脉。在子宫中,子宫动脉在胎盘的母体部分出的毛细血管,与胎盘的子体部胎儿毛细血管靠近,在此处母体和胎儿的血液间进行CO2和O2,代谢产物即代谢废物和营养物质的交换。脐动脉将胎儿产生的废物运送至胎盘,脐静脉将O2和营养物质从胎盘运送给胎儿。由于脐带是分娩过程中的废弃物,同时从脐带中分离脐静动平滑肌细胞方法相对成熟,使得体外培养的脐动脉平滑肌细胞作为研究血管的模型细胞。脐动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
公司实验室分离的人脐动脉平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人脐动脉平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
C(VC)检测 Vitamin B2 (VB2) detection
B1(VB1)检测 The total amino acid (TAA) detection
B2(VB2)检测 Detection of malic dehydrogenase
总基酸(T-AA)检测 Hydroxyproline sample preeatme
小鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA 试剂盒
Rat thrombin aithrombin complex (TAT) ELISA Kit 大鼠抗复合物(TAT)试剂盒
HumanBigEndothelin,BigETELISAKit 人大内皮素(BigET)试剂盒 进口分装
HumanATP-bindingcassetteanspoerG2,ABCG2试剂盒人腺苷三0酸结合盒转运体G2(ABCG2)试剂盒
植物源性食品腰果(cashew)试剂盒20次
HumahromboxaneA2,TX-A2ELISAKit人血栓素A2(TX-A2)试剂盒
腺苷酸活化蛋白激酶γ1抗体
G蛋白调节诱导神经突增生蛋白1抗体
AGRP重组小鼠 AGRP / AgRP 蛋白 (His 标签) Protein
Adropin蛋白(AD)重组蛋白 Recombinant Adropin (AD)
CCDC47重组人 CCDC47 蛋白 (His 标签) Protein
FGF21 Protein Human 重组人 FGF21 蛋白 (His 标签)
TNF Protein Rat 重组大鼠 TNF-alpha / TNFA 蛋白
Adropin蛋白(AD)重组蛋白 Recombinant Adropin (AD)
FGF21 Protein Human 重组人 FGF21 蛋白 (His 标签)
AGRP重组小鼠 AGRP / AgRP 蛋白 (His 标签) Protein
TNF Protein Rat 重组大鼠 TNF-alpha / TNFA 蛋白
CCDC47重组人 CCDC47 蛋白 (His 标签) Protein
人脐动脉平滑肌细胞大鼠无翅型MMTV整合位点家族成员5A(W5A)试剂盒 ,英文名: W5A ELISA Kit
Mouse eosinophil chemotactic protein Eotaxin 1 (Eotaxin 1/CCL11) ELISA Kit 小鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)试剂盒
MouseCXC-chemokinereceptor3,CXCR3ELISAKit 小鼠CXC趋化因子受体3(CXCR3)试剂盒 进口分装
CLIAKitforHSP-20ELISAKit大鼠热休克蛋白20
细胞MSK1激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次
ELISAKitIL-12/P40大鼠白介素12