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更新时间:2024-10-30
人破骨细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
骨髓 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 多核巨细胞 | YS-01X7352 |
细胞简介:
人破骨分离自骨组织和骨髓;破骨细胞是骨组织中的多核巨细胞,位于骨组织表面的浅凹处。目前一般认为破骨细胞是分离自骨骼外的造血系统,其前体可能属于造血干细胞的前单核细胞。破骨细胞的主要功能是维持骨吸收和骨形成的相对平衡,若失去这种平衡则发生病理性变化。因此多数学者从破骨细胞着手研究破骨细胞的结构、功能探讨骨吸收,形成相互平衡的机制。但破骨细胞是一种终末分化细胞,属于不增殖细胞群,不能增殖和传代,只能进行原代培养且存活时间较短。
方法简介:
公司实验室分离的人破骨采用机械分离法/密度梯度离心法和骨髓单核细胞诱导法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人破骨经TRAP染色检测,纯度可达30%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 多核巨细胞
传代特性 属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
小鼠0酸肌醇3激酶试剂盒 小鼠0酸肌醇3激酶试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠0酸肌醇3激酶试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠0酸肌醇3激酶试剂盒、小鼠0酸肌醇3激酶eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠0酸化细胞外信号调节激酶试剂盒 小鼠0酸化细胞外信号调节激酶试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠0酸化细胞外信号调节激酶试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠0酸化细胞外信号调节激酶试剂盒、小鼠0酸化细胞外信号调节激酶eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠细胞蛋白试剂盒 小鼠细胞蛋白试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠细胞蛋白试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠细胞蛋白试剂盒、小鼠细胞蛋白eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠可溶性试剂盒 小鼠可溶性试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠可溶性试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠可溶性试剂盒、小鼠可溶性eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠前列腺素F(PGF)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human thrombin aithrombin complex (TAT) ELISA Kit 人抗复合物(TAT)试剂盒
HumanArginase,ArgELISAKit 人精酶(Arg)试剂盒 96T/48T 进口分装
GuineapigTumornecrosisfactorα,TNF-α试剂盒豚鼠坏死因子α(TNF-α)试剂盒规格:96T/48T
真菌/酵母细胞染色质免疫沉淀分析(CHIP)试剂盒10次
MouseBonemorphogeneticprotein4,BMP-4ELISAKit小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)试剂盒规格:96T/48T
纤维母细胞生长因子4抗体
GLIS1蛋白抗体
IL4R重组大鼠 IL4R / Il4ra 蛋白 (Fc 标签) Protein
DNA-PKcs peptide DNA依赖蛋白激酶催化亚基多肽抗原 0.5mgDNA-PKcs peptide DNA依赖蛋白激酶催化亚基多肽抗原
USP5重组人 USP5 / ISOT 蛋白 Protein
CSAG1 Protein Human 重组人 CSAGE / CSAG1 蛋白 (Fc 标签)
TNFRSF10B Protein Mouse 重组小鼠 TRAIL R2 / CD262 / TNFRSF10B 蛋白
DNA-PKcs peptide DNA依赖蛋白激酶催化亚基多肽抗原 0.5mgDNA-PKcs peptide DNA依赖蛋白激酶催化亚基多肽抗原
CSAG1 Protein Human 重组人 CSAGE / CSAG1 蛋白 (Fc 标签)
IL4R重组大鼠 IL4R / Il4ra 蛋白 (Fc 标签) Protein
TNFRSF10B Protein Mouse 重组小鼠 TRAIL R2 / CD262 / TNFRSF10B 蛋白
USP5重组人 USP5 / ISOT 蛋白 Protein
人破骨细胞大鼠细胞间粘附分子2(ICAM2)试剂盒 ,英文名: ICAM2 ELISA Kit
Mouse somatostatin (SS) ELISA Kit 小鼠(SS)试剂盒
MouseCyclicguanosinemonophosphate,cGMPELISAKit 小鼠环0酸鸟苷(cGMP)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHSP-40(HumanHeatShockProtein40)ELISAKit人热休克蛋白40
细胞MAPKAPKINASE3激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次
ELISAKitIL-17大鼠白介素17
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。