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更新时间:2024-10-30
人脉络膜微血管内皮细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
脉络膜组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 内皮细胞样 | YS-01X7426 |
细胞简介:
人脉络膜微血管内皮分离自眼球脉络膜组织;脉络膜在视网膜和巩膜之间,含有丰富血管和色素细胞,对外力冲击的耐受性较视网膜差,当眼球受到从前面来的外力的冲击作用通过玻璃体传到后极部时,坚硬的巩膜在其外面又有抵抗作用,使脉络膜在内外两种作用夹攻下而发生破裂和出血。脉络膜呈暗褐色,围绕视神经乳头部有照膜,为青绿色带金属光泽的三角形区。脉络膜是眼球中膜的后2/3处的薄膜,由纤维组织、小血管和毛细血管组成,软而薄,棕红色,在巩膜和视网膜之间,续连于睫状体后方。脉络膜的血循环营养视网膜外层,其含有的丰富色素起遮光暗房作用。主要功能是营养视网膜外层及玻璃体,并有遮光作用,使反射的物象清楚。同时对视觉系统起保护作用,对整个视觉神经有调节作用。续连于睫状体后方,含丰富的血管和色素细胞,有营养和遮光作用。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
公司实验室分离的人脉络膜微血管内皮采用胶原酶-混合消化法结合密度梯度离心法、最后通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人脉络膜微血管内皮经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件 PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
兔子神经营养因子4(-4)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔子神经营养因子3(-3)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔子神经特异性烯醇化酶(NSE)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔子神经生长因子(NGF)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA 试剂盒 96T/48T
Rat heat shock protein 20 (HSP-20) ELISA Kit 大鼠热休克蛋白20(HSP-20)试剂盒
Humanglucokinaseregulatoryprotein,GKRPELISAKit 人葡萄糖激酶调节蛋白(GKRP)试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanC-typenaiureticpeptide,CNP试剂盒人C型尿肽(CNP)试剂盒规格:96T/48T
植物组织质膜(plasmamembrane)分离试剂盒20次
Humansolubletumornecrosisfactor-relatedapoptosisinducingligand,sAILELISAKit人可溶性坏死因子相关凋亡诱导配体(sAIL)试剂盒规格:96T/48T
铁硫簇整合同源物2蛋白抗体
CD99抗体
ROR1重组人 ROR1 蛋白 (aa 453-783, His & GST 标签) Protein
solute carrier family 1 溶质携带物家族-1(抗原 0.5mgsolute carrier family 1 溶质携带物家族-1(抗原)
SPP1重组人 Osteopontin / SPP1 / ETA-1 蛋白 Protein
GALNT10 Protein Human 重组人 GALNT10 / GalNAc-T10 蛋白
PDCD1LG2 Protein Human 重组人 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白 (His & Fc 标签)
solute carrier family 1 溶质携带物家族-1(抗原 0.5mgsolute carrier family 1 溶质携带物家族-1(抗原)
GALNT10 Protein Human 重组人 GALNT10 / GalNAc-T10 蛋白
ROR1重组人 ROR1 蛋白 (aa 453-783, His & GST 标签) Protein
PDCD1LG2 Protein Human 重组人 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白 (His & Fc 标签)
SPP1重组人 Osteopontin / SPP1 / ETA-1 蛋白 Protein
人脉络膜微血管内皮细胞大鼠纤维蛋白肽B(FPB)试剂盒 ,英文名: FPB ELISA Kit
Mouse chorionic gonadoopin (CG) ELISA Kit 小鼠绒毛膜(CG)试剂盒
Mousemaixmetalloproteinase5,MMP-5ELISAKit 小鼠基质金属蛋白酶5(MMP-5)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHuman2,3-dinohromboxaneB2,2,3-dinor-TXB2ELISAKit人2,3Dinor血栓烷B2
细胞HSV(HERPESSIMPLX)病毒定性试剂盒20次
ELISAKitEGF大鼠表皮生长因子
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