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更新时间:2024-10-30
人卵巢成纤维细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
卵巢组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 成纤维细胞样 | YS-01X7221 |
细胞简介:
人卵巢成纤维分离自卵巢组织;卵巢是雌性动物的生殖器官,卵巢的功能是产生卵以及类固醇激素。卵巢的位置与睾丸相同,仅左侧发育(右侧已退化),呈葡萄状,均为处于不同发育时期的卵泡,卵泡呈黄色,卵巢表面密布血管。卵巢的大小与年龄和产卵期有关。大多数脊椎动物有两个卵巢,但是部分鱼类的两个卵巢融合为单个结构,而所有鸟类只有左侧卵巢有机能。卵巢是位于子宫两侧的一对卵圆形的生殖器官,它的外表有一层上皮组织,其下方有薄层的结缔组织。卵巢的内部结构可分为皮质和髓质。皮质位于卵巢的周围部分,主要由卵泡和结缔组织构成;髓质位于中央,由疏松结缔组织构成,其中有许多血管、淋巴管和神经。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来;成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的卵巢成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。卵巢成纤维细胞大多分布于卵巢表面,其主要特点和功能:①成纤维细胞在体外易于培养;②卵巢损伤后,成纤维细胞能修复和重塑卵巢;③能在卵巢炎症时有效控制炎症扩散。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
公司实验室分离的人卵巢成纤维采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人卵巢成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
小鼠血栓调节蛋白(mouse TM) 作用: ELISA 规格: 进口分装
小鼠型纤溶酶原激活物(mouse uPA) 作用: ELISA 规格: 进口分装
小鼠型纤溶酶原激活物受体(mouse uPA-R) 作用: ELISA 规格: 进口分装
小鼠血管细胞粘附分子-1(mouse sVCAM-1) 作用: ELISA 规格: 进口分装
小鼠雄(ASD)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human granulocyte specific ainuclear aibody (GS-ANA) ELISA Kit 人粒细胞特异性抗核抗体(GS-ANA)试剂盒
Humanurinaryfreecoisol,UFCELISAKit 人尿游离(UFC)试剂盒 96T/48T 进口分装
Chicken5-Nucleotidase,5-试剂盒鸡5核苷酸酶(5-)试剂盒规格:96T/48T
月季花培养基500毫升溶液/片剂
Mousehydroxyproline,HypELISAKit小鼠羟脯(Hyp)试剂盒规格:96T/48T
四连接同源蛋白FJX1抗体
BCL2样10促凋亡蛋白抗体
CNTN5重组人 Contactin 5 / CNTN5 蛋白 Protein
免疫球蛋白样EGF样域酪激酶1(Tie1)重组蛋白 Recombinant Tyrosine Kinase With Immunoglobulin Like And EGF Like Domains Protein 1 (Tie1)
GKN1重组人 GKN1 / Gastrokine 1 蛋白 Protein
CD68 Protein Human 重组人 CD68 / Macrosialin / Gp110 蛋白 (His & Fc 标签)
HA Protein H7N9 重组甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/2/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
免疫球蛋白样EGF样域酪激酶1(Tie1)重组蛋白 Recombinant Tyrosine Kinase With Immunoglobulin Like And EGF Like Domains Protein 1 (Tie1)
CD68 Protein Human 重组人 CD68 / Macrosialin / Gp110 蛋白 (His & Fc 标签)
CNTN5重组人 Contactin 5 / CNTN5 蛋白 Protein
HA Protein H7N9 重组甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/2/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
GKN1重组人 GKN1 / Gastrokine 1 蛋白 Protein
人卵巢成纤维细胞大鼠线粒体超氧化物歧化酶(SOD2)试剂盒 ,英文名: SOD2 ELISA Kit
Pla indole-3-acetic acid (IAA) ELISA Kit 植物吲哚乙酸(IAA)试剂盒
Mousesolublevasccularcelladhesionmolecule1,sVCAM-1ELISAKit 小鼠可溶性血管细胞粘附分子1(sVCAM-1)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHumanAgrinELISAKit人聚集蛋白
细胞HHV6-A(HUMANHERPESVIRUS6-A)病毒定性试剂盒20次
ELISAKitiFABP大鼠肠脂肪酸结合蛋白