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更新时间:2024-10-30
人滑膜细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
滑膜组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 成纤维细胞样 | YS-01X7321 |
细胞简介:
人滑膜分离自滑膜组织;滑膜组织是位于关节腔内面的内衬结构,各种关节内疾病均会累及滑膜。而滑膜细胞是维持关节正常功能的重要组织结构,同时在各种关节疾患中也是主要病变部位。骨关节炎(OA)以关节软骨退行性变为特征,其病理改变累及关节的各个组成部分,但绝不仅局限于软骨,还包括软骨下骨、滑膜、半月板和韧带。各组成部分的病理改变相互影响,相互作用,共同加速关节的退变。滑膜细胞是构成滑膜层的细胞群体,是维持关节正常功能的重要组织结构,它包埋在颗粒状无定性的基质中,基质内有分散的纤维分布。滑膜由A型(巨噬样滑膜细胞)、B型(成纤维样滑膜细胞)以及C型(树突细胞样滑膜细胞)细胞组成。滑膜细胞主要功能:①滑膜细胞产生润滑液成分,并且与关节腔的吸收和血液/润滑液交换有关;②滑膜细胞增生,表现为不依赖于支持物生长,并且分泌大量的效应分子来促进炎症和关节损坏;③是自身自分泌和旁分泌网络中效应因子的一部分。
方法简介:
公司实验室分离的人滑膜采用混合酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人滑膜经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
兔白介素6(IL-6)试剂盒 96T/48T
兔白介素17(IL-17)试剂盒 96T/48T
兔白介素1(IL-1)试剂盒 96T/48T
兔(ADR)试剂盒 96T/48T
小鼠Ⅲ型前胶原基端肽(PⅢ)ELISA 试剂盒 96T/48T
Rat cyclin D2 (Cyclin-D2) ELISA Kit 大鼠细胞周期素D2(Cyclin-D2)试剂盒
HumanHydrocoisone,HYDELISAKit 人轻化1(HYD)试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanComplemefragme5b,C5b试剂盒人补体片断5b(C5b)试剂盒规格:96T/48T
组织CDK3/CYCLINE激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次
Humanproteinase-aineuophilcytoplasmicaibody,PR3-ANCAELISAKit人蛋白酶3特异性抗中性粒细胞胞质抗体(PR3-ANCA)试剂盒规格:96T/48T
三磷酸肌醇3激酶B抗体
21号染色体开放阅读框62抗体
IL1B重组兔 IL-1 beta / IL1B 蛋白 Protein
NKG2A/CD159a/KLRC1 NK细胞受体2A/自然杀伤细胞活化性受体2A抗原 0.5mgNKG2A/CD159a/KLRC1 NK细胞受体2A/自然杀伤细胞活化性受体2A抗原
FOLR1重组人 FOLR1 / Folate receptor alpha 蛋白 Protein
ICAM4 Protein Human 重组人 ICAM4 / CD242 蛋白 (Fc 标签)
REG3B Protein Mouse 重组小鼠 REG3B / Pap1 蛋白
NKG2A/CD159a/KLRC1 NK细胞受体2A/自然杀伤细胞活化性受体2A抗原 0.5mgNKG2A/CD159a/KLRC1 NK细胞受体2A/自然杀伤细胞活化性受体2A抗原
ICAM4 Protein Human 重组人 ICAM4 / CD242 蛋白 (Fc 标签)
IL1B重组兔 IL-1 beta / IL1B 蛋白 Protein
REG3B Protein Mouse 重组小鼠 REG3B / Pap1 蛋白
FOLR1重组人 FOLR1 / Folate receptor alpha 蛋白 Protein
人滑膜细胞大鼠血管内皮生长因子121(VEGF121)试剂盒 ,英文名: VEGF121 ELISA Kit
Mouse aldosterone (ALD) ELISA Kit 小鼠固酮(ALD)试剂盒
Mousesolubleierleukin-1receptorⅡ,IL-1sRⅡELISAkit 小鼠白介素1可溶性受体Ⅱ(IL-1sRⅡ)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHumanarabinogalactanproteins,AGPsELISAKit人阿拉伯半乳糖蛋白
细胞EPHB3激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次
ELISAKitCETP大鼠酯转移蛋白
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
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