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更新时间:2024-10-30
人大隐静脉平滑肌细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
大隐静脉组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 成纤维细胞样 | YS-01X7300 |
细胞简介:
人大隐静脉平滑肌分离自大隐静脉;大隐静脉起于足背静脉弓内侧端,经内踝前方,沿小腿内侧缘伴隐神经上行,经股骨内侧髁后方,进入大腿内侧部,与股内侧皮神经伴行,逐渐向前上,在耻骨结节外下方穿隐静脉裂孔,汇入股静脉,其汇入点称为隐股点。有5条属支:旋髂浅静脉、腹壁浅静脉、外静脉、股内侧浅静脉和股外侧浅静脉,它们汇入大隐静脉的形式多样,相互间吻合丰富。大隐静脉曲张行高位结扎时,须分别结扎、切断各属支,以防复发。大隐静脉平滑肌细胞主要功能:①血管平滑肌细胞的生长潜力是原发血管病发的重要异常因素;②参与血管壁的炎症反应,并与血管疾病的进展和稳定有关。因此,研究大隐静脉平滑肌细胞的代谢和信号通路是研究大隐静脉扩张等疾病的良好实验材料。大隐静脉平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
公司实验室分离的人大隐静脉平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人大隐静脉平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
唾液酸(SA)测试盒(带SA标准) Saliva acid (SA) test case (with SA standard)
肝素溶液 Heparin solion
肝素抗凝管 Heparin aicoagula tube
肝素抗凝管 Heparin aicoagula tube
小鼠(CH)试剂盒 96T/48T
Human placeal lactogen (PL) ELISA Kit 人胎盘泌乳素(PL)试剂盒
Humahrombin-aithrombincomplex,TATELISAKit 人抗复合物(TAT)试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanazurocidin,AZU试剂盒人天青杀素(AZU)试剂盒规格:96T/48T
植物源性饲料大豆试剂盒20次
Humahrombin,TMELISAKit人(TM)试剂盒规格:96T/48T
磷酸化转录生长因子SP1抗体
有丝分裂控制蛋白dis3抗体
KIT重组大鼠 KIT / c-KIT 蛋白 Protein
FGF4/HSTF1/HBGF-4(Fibroblast Growth Factor4 0.5mgFGF4/HSTF1/HBGF-4(Fibroblast Growth Factor4) 纤维母细胞生长因子4抗原
TLK1重组人 TLK1 / PKU-beta 蛋白 (His & GST 标签) Protein
FGFR2 Protein Human 重组人 FGFR2 / CD332 蛋白 (aa 400-821, His & GST 标签)
EFNB1 Protein Mouse 重组小鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (Fc 标签)(Fc 标签)
FGF4/HSTF1/HBGF-4(Fibroblast Growth Factor4 0.5mgFGF4/HSTF1/HBGF-4(Fibroblast Growth Factor4) 纤维母细胞生长因子4抗原
FGFR2 Protein Human 重组人 FGFR2 / CD332 蛋白 (aa 400-821, His & GST 标签)
KIT重组大鼠 KIT / c-KIT 蛋白 Protein
EFNB1 Protein Mouse 重组小鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (Fc 标签)(Fc 标签)
TLK1重组人 TLK1 / PKU-beta 蛋白 (His & GST 标签) Protein
人大隐静脉平滑肌细胞大鼠胰淀素(IAPP)试剂盒 ,英文名: IAPP ELISA Kit
Mouse endothelial niic oxide syhase (eNOS) ELISA Kit 小鼠内皮型合成酶(eNOS)试剂盒
MouseTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKIT 小鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHumancyclophilinA,CyPAELISAKit人嗜环蛋白/亲环素A
细胞ATP生物发光法定量试剂盒50次
ELISAKitCasp-3大鼠胱天蛋白酶3