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更新时间:2024-10-29
大鼠小肠隐窝上皮细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
小肠组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 上皮细胞样 | YS-01X7151 |
细胞简介:
大鼠小肠隐窝上皮分离自小肠组织;小肠位于腹中,上端接幽门与胃相通,下端通过阑门与大肠相连,是食物消化吸收的主要场所。小肠盘曲于腹腔内,上连胃幽门,下接盲肠,分为十二指肠、空肠和回肠三部分。小肠内消化是至关重要的,因为食物经过小肠内胰液、胆汁和小肠液的化学性消化及小肠运动的机械性消化后,基本上完成了消化过程,同时营养物质被小肠粘膜吸收了。小肠管壁由粘膜、粘膜下层、肌层和浆膜构成。其结构特点是管壁有环形皱襞,粘膜有许多绒毛,绒毛根部的上皮下陷至固有层,形成管状的肠腺,其开口位于绒毛根部之间。绒毛和肠腺与小肠的消化和吸收功能关系密切;构成肠腺的细胞有柱状细胞、杯状细胞、潘氏细胞和未分化细胞。柱状细胞和内分泌细胞与绒毛上皮相似,接近绒毛的柱状细胞与吸收细胞相似,绒毛深部的柱状细胞微绒毛少而短,不形成纹状缘。小肠有三种功能即消化、吸收和分泌及运动功能,其中以吸收和分泌功能为主。小肠腔面的环行皱襞从幽门附近开始出现,在十二指肠末段和空肠头段极发达,向下逐渐减少和变矮,至肠中段以下基本消失。粘膜表面还有许多细小的肠绒毛,是由上皮和固有层向肠腔突起而成,形状不一,以十二指肠和空肠头段发达。绒毛于十二指肠呈叶状,于空肠呈指状,于回肠则细而短。环行皱襞和绒毛使小肠表面积扩大20-30倍,绒毛根部的上皮下隐至固有层形成管状的小肠腺,又称肠隐窝,故小肠腺与绒毛的上皮是连续的,小肠腺直接开口于肠腔。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠小肠隐窝上皮采用先机械分离法、后胶原酶消化法并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠小肠隐窝上皮经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
兔血栓素B2(TXB2)试剂盒 96T/48T
兔血清总补体(CH50)试剂盒 96T/48T
兔血清(NO)试剂盒 96T/48T
兔血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)试剂盒 96T/48T
小鼠α半乳糖基抗体(Gal)ELISA 试剂盒 96T/48T
Rat aquaporin 2 (AQP-2) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白2(AQP-2)试剂盒
Humanprogesteronereceptor,PGRELISAKit 人孕酮受体(PGR)试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanChorionicGonadoophin,HCG试剂盒人绒毛膜(HCG)试剂盒规格:96T/48T
总微型RNA(miRNA)电泳法分离试剂盒20次
HumanSalmonellatyphiaigen,St-AgELISAKit人伤寒抗原(St-Ag)试剂盒规格:96T/48T
钙连蛋白重组兔单克隆抗体
神经细胞蜡样质脂褐质沉积病蛋白CLN3抗体
结晶紫染色液 100ml
TrK A (h-NGFR 0.5mgTrK A (h-NGFR) (p140- TrK A) 神经生长因子的一种(抗原)
CD226重组人 CD226 / DNAM-1 蛋白 Protein
GYPC Protein Human 重组人 GYPC / Glycophorin-C 蛋白
NBL1 Protein Human 重组人 NBL1 / DAND1 / DAN 蛋白
TrK A (h-NGFR 0.5mgTrK A (h-NGFR) (p140- TrK A) 神经生长因子的一种(抗原)
GYPC Protein Human 重组人 GYPC / Glycophorin-C 蛋白
结晶紫染色液 100ml
NBL1 Protein Human 重组人 NBL1 / DAND1 / DAN 蛋白
CD226重组人 CD226 / DNAM-1 蛋白 Protein
大鼠小肠隐窝上皮细胞大鼠组蛋白脱乙酰基酶1(HDAC1)试剂盒 ,英文名: HDAC1 ELISA Kit
Mouse ai thyroid peroxidase aibody (TPO-Ab) ELISA Kit 小鼠抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)试剂盒
MouseAi-glucoprotein210,GP210ELISAKit 小鼠抗核膜糖蛋白210抗体(gp210)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHumanmacrophagestimulatingprotein,MSPELISAKit人巨噬细胞刺激蛋白
土壤α活性EPS-G7酶偶联比色法定量试剂盒20次
ELISAKitACA-IgG大鼠抗心0脂抗体IgG
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
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