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基础信息Product information
产品名称:

大鼠食管成纤维细胞

产品简介:

大鼠食管成纤维细胞公司正在出售的产品:组织相容性抗原DQA1重组兔单克隆抗体 神经丛蛋白A4抗体 氧固醇结合蛋白样10抗体 大鼠视网膜色素上皮细胞 小鼠卵巢上皮细胞 人黑色素瘤细胞;MNT-1 CCC-SMC-1 (兔主动脉平滑肌细胞)

产品型号:

厂商性质:经销商

访问量:80

更新时间:2024-10-29

产品特性Product characteristics

大鼠食管成纤维细胞

大鼠食管成纤维细胞

商品属性:

组织来源

产品规格

细胞形态

货号

食管

5×105cells/T25细胞培养瓶

成纤维细胞样

YS-01X7826

细胞简介:

大鼠食管成纤维分离自食管组织;食管是咽和胃之间的消化管,食管在系统发生上起初很短,随着颈部的伸长和心肺的下降,而逐渐增长。食管可分为颈段、胸段和腹段。脊椎动物食管的颈段位于气管背后和脊柱前端,胸段位于左、右肺之间的纵膈内,胸段通过膈孔与腹腔内腹相连,腹段很短与胃相连。在发育过程中,食管的上皮细胞增殖,由单层变为复层,食管使管腔变狭窄,甚至一度闭锁,以后管腔又重新出现。哺乳动物的食管结构上由内向外分四层:黏膜层、黏膜下层、肌层和外膜。其中,黏膜层,包括上皮、固有层和黏膜肌层。食管的外膜,由疏松结缔组织构成,富有血管、淋巴管及神经。主要包含食管成纤维细胞,成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的表皮成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。

方法简介:

实验室分离的大鼠食管成纤维采用 - 胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10cells/瓶。

质量检测:

实验室分离的大鼠食管成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息:

培养基:基础培养基,含FBSbFGFInsulinPenicillinStreptomycin

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性:贴壁

细胞形态:成纤维细胞样

传代特性:可传2-3代左右

消化液:0.25%

培养条件:气相:空气,95%CO25%

大鼠食管成纤维细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。

大鼠食管成纤维细胞

细胞传代及冻存:

细胞传代步骤细胞冻存步骤
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

原代细胞的培养方法一般有以下4种:

  ① 组织块培养法

  组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

  ② 消化培养法

  ③ 悬浮细胞培养法

  对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

  ④器官培养

  器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。

大鼠食管成纤维细胞


公司正在出售的产品:

人正辅因子4(PC4)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human PC4 (Positive Cofactor 4) ELISA Kit

人脂蛋白关联0脂酶A2(LpPLA2)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human LpPLA2 (Phospholipase A2, Lipoprotein Associated) ELISA Kit

人脂蛋白脂酶(LPL)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human LPL (Lipoprotein Lipase) ELISA Kit

人脂多糖结合蛋白(LBP)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human LBP (Lipopolysaccharide Binding Protein) ELISA Kit

豚鼠白介素8(IL8)试剂盒 ,英文名: IL8 ELISA Kit

Human ierferon inducible protein 10 (IP-10/CXCL10) ELISA Kit 人干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)试剂盒

rabbitNervegrowthfactor,NGFELISAKit 兔子神经生长因子(NGF)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforAZTELISAKit大鼠

线虫亚(ENU)诱导突变试剂盒10

RabbitApolipoproteinE,Apo-EELISAKit兔载脂蛋白E(Apo-E)试剂盒规格:96T/48T

垂体特异性同源因子抗体

内脏移位线管蛋白CFC1蛋白抗体

IL18R1重组大鼠 IL18R1 蛋白 (Fc 标签) Protein

GSK-3 Alpha (Glycogen Synthase Kinase-3 alpha 0.5mgGSK-3 Alpha (Glycogen Synthase Kinase-3 alpha) 葡萄糖合成激酶-3α抗原(多肽抗原)

CAMKV重组人 CAMKV 蛋白 (His & GST 标签) Protein

ING5 Protein Human 重组人 ING5 蛋白 (GST 标签)

EREG Protein Mouse 重组小鼠 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 标签)

GSK-3 Alpha (Glycogen Synthase Kinase-3 alpha 0.5mgGSK-3 Alpha (Glycogen Synthase Kinase-3 alpha) 葡萄糖合成激酶-3α抗原(多肽抗原)

ING5 Protein Human 重组人 ING5 蛋白 (GST 标签)

IL18R1重组大鼠 IL18R1 蛋白 (Fc 标签) Protein

EREG Protein Mouse 重组小鼠 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 标签)

CAMKV重组人 CAMKV 蛋白 (His & GST 标签) Protein

大鼠食管成纤维细胞人整合素αⅤβ3(Iegrin αⅤβ3)ELISA 试剂盒

Human tumor necrosis factor alpha (TNF- alpha) ELISA Kit 人肿瘤坏死因子α(TNF-α)试剂盒

Humanalpha-L-fucosidase,AFUELISAKit 人αL岩藻糖苷酶(AFU)试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanimmunoglubinjoiningchain,Ig-j试剂盒j(Ig-j)试剂盒规格:96T/48T

组织基质金属蛋白酶(MMP-13)活性荧光定量试剂盒20(10样本)

HumanleukocyteaigenC,HLA-CELISAKit人类白细胞抗原C(HLA-C)试剂盒规格:96T/48T

原代细胞的培养条件:

  一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养

  1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;

  2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;

  3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;

  4、 胎牛血清浓度为10%-80%

  5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;

  6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;

  7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;

  8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。

  二、悬浮细胞培养

  1、原代培养时要尽量去除红细胞;

  2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;

  3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;

  4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;

  5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;

  6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。


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