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更新时间:2024-10-29
大鼠肌腱干细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
肌腱组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7505 |
细胞简介:
大鼠肌腱干分离自肌腱组织;肌腱是肌腹两端的索状或膜状致密结缔组织,便于肌肉附着和固定。一块肌肉的肌腱分附在两块或两块以上的不同骨上,是由于肌腱的牵引作用才能使肌肉的收缩带动不同骨的运动。每一块骨骼肌都分成肌腹和肌腱两部分,肌腹由肌纤维构成,色红质软,有收缩能力,肌腱由致密结缔组织构成,色乳白较硬,没有收缩能力。肌腱把骨骼肌附着于骨骼。长肌的肌腱多呈圆索状,阔肌的肌腱阔而薄,呈膜状,又叫腱膜。此处的肌腹即为通常所说的红肌,而肌腱即为白肌,分别控制肌肉的力量、爆发力和耐力。肌腱干细胞(TSCs)是一种来源于肌腱组织的间充质干细胞,其具有多向分化潜能,并且在外源性前列腺素E2作用下异常分化。体外培养时该细胞群具有克隆形成能力、自我更新及多向分化潜能等干细胞的普遍特性。肌腱干细胞可以被诱导向脂肪细胞、软骨样细胞、骨细胞分化;在裸鼠模型中,肌腱干细胞还可以形成肌腱样组织,软骨样组织以及腱-骨连接样组织等。相比骨髓间充质干细胞而言,TSCs具有更好的克隆形成能力和增殖能力,软骨相关基因和肌腱相关基因表达更高,具有更好的成骨、成脂和成软骨能力,因此可以作为组织工程中的种子细胞。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠肌腱干采用胶原酶、混合消化法并通过肌腱干细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠肌腱干经CD44免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 梭形、多角形
传代特性 可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
人组胺(HIS)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人抵抗素(Resistin)ELISAKIT ELISA. 96T/48T
人骨特异性碱性0酸酶B(ALP-B)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人骨钙素/骨谷酸蛋白(OT/BGP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
豚鼠环0酸鸟苷(cGMP)试剂盒 ,英文名: cGMP ELISA Kit
Human hepatitis D virus IgG (HDV IgG) ELISA Kit 人丁型肝IgG(HDV IgG)试剂盒
MonkeyapoproteinB100,apo-B100ELISAKit 猴载脂蛋白B100(apo-B100)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforbFGF-4ELISAKit大鼠碱性成纤维细胞生长因子4
细菌色酶比色法定量试剂盒20次
RabbitIerleukin17,IL-17ELISAKit兔白介素17(IL-17)试剂盒规格:96T/48T
DNA甲基转移酶-3α抗体
宫颈癌抑癌蛋白5/锌指蛋白434抗体
B18R重组牛痘病毒 B18R / B19R 蛋白 Protein
TIMP-2(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-2 0.5mgTIMP-2(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-2) 金属蛋白酶组织抑制因子-2(抗原)
TIGIT重组人 TIGIT / VSTM3 蛋白 Protein
IL20RA Protein Human 重组人 IL20RA / IL-20RA 蛋白 (ECD, Fc 标签)
MAPK14 Protein Human 重组人 p38 alpha / MAPK14 蛋白
TIMP-2(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-2 0.5mgTIMP-2(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-2) 金属蛋白酶组织抑制因子-2(抗原)
IL20RA Protein Human 重组人 IL20RA / IL-20RA 蛋白 (ECD, Fc 标签)
B18R重组牛痘病毒 B18R / B19R 蛋白 Protein
MAPK14 Protein Human 重组人 p38 alpha / MAPK14 蛋白
TIGIT重组人 TIGIT / VSTM3 蛋白 Protein
大鼠肌腱干细胞小鼠β内啡肽受体(β-EPR)ELISA 试剂盒
Human vitamin B6 (VB6) ELISA Kit 人B6(VB6)试剂盒
HumanCollagenaseTypeIIELISAKit 人胶原酶II(CollagenaseII)试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanc-fos试剂盒人c-fos试剂盒规格:96T/48T
转基因玉米MON863品系基因定量试剂盒20次
Humanserine/threonineproteinkinase,STKELISAKit人丝/苏蛋酸酶(STK)试剂盒规格:96T/48T
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。