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更新时间:2024-10-29
大鼠呼吸道上皮细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
呼吸道 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 上皮细胞样 | YS-01X7502 |
细胞简介:
大鼠呼吸道上皮分离自呼吸道;呼吸道是肺呼吸时气流所经过的通道,有肺脊椎动物的呼吸道分上、下两部:鼻、咽和喉合称上呼吸道。气管及其以后一分再分的管道,合称为下呼吸道,或称为气管树。气管树是随着动物的进化逐渐复杂化的。整个呼吸道内表面都分布有分泌液和纤毛(鼻孔、咽后壁和声带黏膜除外),它能温暖(或冷却)、湿润和净化吸入的空气,对于呼吸器官和机体有着保护作用。呼吸道以骨或软骨做支架,其内表面覆盖着黏膜,黏膜内分布着丰富的毛细血管。呼吸道上皮细胞属于假复层纤毛柱状上皮,分布于呼吸道的内表面,主要由柱状,杯形,梭形和锥形等不同形状细胞组成。看上去像复层上皮,但实际上所有细胞底部均附于基膜上,属单层上皮,故称假复层柱状上皮,上皮表面有纤毛,杯状细胞可分泌粘液,包裹着大量细菌,借助纤毛不断摆动将其慢慢移动至出消化道。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠呼吸道上皮采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠呼吸道上皮经pan-cytokeratin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
木聚糖酶测试盒 可见分光光度法 50管/24样
酸性木聚糖酶测试盒 可见分光光度法 50管/24样
碱性木聚糖酶测试盒 可见分光光度法 50管/24样
β-木糖苷酶测试盒 可见分光光度法 50管/24样
猪雌激素(E)ELISA 试剂盒
Human macrophage inflammatory protein 3 alpha (MIP-3 alpha /CCL20) ELISA Kit 人巨噬细胞性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)试剂盒
Porcinegasieceptor,GsaRELISAKit 猪促胃液素受体(GsaR)试剂盒 进口分装
CLIAKitforALP-B(MouseBone-specificAlkphaseB)ELISAKit小鼠骨特异性碱性0酸酶B
血液0酸二酯酶5(PDE5)活性酶连续循环定0比色法定量试剂盒20次
Mouseα-Glucosidase,a-GluELISAKit小鼠α葡萄糖苷酶(a-Glu)试剂盒
CD71单克隆抗体
甘油激酶抗体
TNFRSF13C重组大鼠 BAFFR / TNFRSF13C 蛋白 Protein
Cyclin D2 周期素D2抗原 0.5mgCyclin D2 周期素D2抗原
TXN重组人 Thioredoxin / TXN / SASP 蛋白 Protein
ALDOB Protein Human 重组人 ALDOB / Aldolase B 蛋白 GST 标签
NT5E Protein Mouse 重组小鼠 CD73 / NT5E 蛋白 (His 标签)
Cyclin D2 周期素D2抗原 0.5mgCyclin D2 周期素D2抗原
ALDOB Protein Human 重组人 ALDOB / Aldolase B 蛋白 GST 标签
TNFRSF13C重组大鼠 BAFFR / TNFRSF13C 蛋白 Protein
NT5E Protein Mouse 重组小鼠 CD73 / NT5E 蛋白 (His 标签)
TXN重组人 Thioredoxin / TXN / SASP 蛋白 Protein
大鼠呼吸道上皮细胞小鼠半胱酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA 试剂盒
Rat aldosterone (ALD) ELISA Kit 大鼠固酮(ALD)试剂盒
Humanexacellularsignal-regulatedkinase,ERKELISAKit 人细胞外信号调节激酶(ERK)试剂盒 进口分装
HumanBrucellaAibodyIgG,BrucellaAbIgG试剂盒人菌抗体IgG(BrucellaAbIgG)试剂盒
植物组织叶绿体DNA萃取试剂盒10/20次
Humansolublevascularendothelialgrowthfactorreceptor-2,VEGFR-2/sFLK-1ELISAKit人可溶性血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2/sFLK-1)试剂盒
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。