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更新时间:2024-10-29
大鼠肝实质细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
肝脏组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 上皮细胞样 | YS-01X7135 |
细胞简介:
大鼠肝实质分离自肝脏组织;肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官,并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用;肝脏也制造消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里最大的器官,位于机体中的腹部位置,在右侧横隔膜之下,位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方,胃的上方。肝脏是机体消化系统中最大的消化腺,为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官,又是新陈代谢的重要器官。肝脏在机体位置和形态结构:肝脏位于右上腹,隐藏在右侧膈下和肋骨深面,大部分肝为肋弓所复盖,仅在腹上区、右肋弓间露出并直接接触腹前壁,肝上面则与膈及腹前壁相接。肝实质细胞是指具有肝功能的单位,是肝脏的基本组成单位之一。肝实质细胞与主要病生理变化:急性肝炎、肝硬化、肝脓肿。肝实质细胞属于中高度分化细胞,生长营养需求高,在体外存活时间短;细胞呈圆形或多角形,核大而圆,居中,常染色质丰富,部分有双核或多倍体核。肝脏作为体内重要的器官,在整个物质代谢过程中具有广泛而多样的作用。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠肝实质采用混合酶灌流消化、反复低速离心制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠肝实质经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
小鼠特异生长因子/相关因子(TSGF)试剂盒 96T/48T
小鼠坏死因子样弱凋亡因子(TWEAK)试剂盒 96T/48T
小鼠坏死因子相关凋亡诱导配体4(AIL-R4)试剂盒 96T/48T
小鼠坏死因子相关凋亡诱导配体3(AIL-R3)试剂盒 96T/48T
小鼠天门冬酸基转移酶(AST)试剂盒 96T/48T
Human chondroitin sulfate (CS) ELISA Kit 人软骨素(CS)试剂盒
HumanMannoseELISAKit 人甘露糖(Mannose)试剂盒 96T/48T 进口分装
ChickenansformingGrowthfactorβ2,TGF-β2试剂盒鸡转化生长因子β2(TGF-β2)试剂盒规格:96T/48T
载玻片细胞RyR受体蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次
Mouseesogen,EELISAKit小鼠雌激素(E)试剂盒规格:96T/48T
组织蛋白酶H轻连抗体
雌酮-3-葡糖苷酸抗体
HA重组甲型流感 H9N2 (A/Guinea fowl/Hong Kong/WF10/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
rh-EGF(Recombinant Epidermal growth factor 0.1mgrh-EGF(Recombinant Epidermal growth factor)
SERPINF2重组人 SerpinF2 / SERPINF2 蛋白 Protein
CGA Protein Human 重组人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 蛋白
HMGB1 Protein Human 重组人 HMGB1 / HMG1 蛋白 (Fc 标签)
rh-EGF(Recombinant Epidermal growth factor 0.1mgrh-EGF(Recombinant Epidermal growth factor)
CGA Protein Human 重组人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 蛋白
HA重组甲型流感 H9N2 (A/Guinea fowl/Hong Kong/WF10/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
HMGB1 Protein Human 重组人 HMGB1 / HMG1 蛋白 (Fc 标签)
SERPINF2重组人 SerpinF2 / SERPINF2 蛋白 Protein
大鼠肝实质细胞小鼠硫氧还蛋白还原酶(xR)ELISA 试剂盒
Neuroophic factor of rat glial cell line derived (GDNF) ELISA Kit 大鼠胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)试剂盒
Humanneurofilameprotein,NFELISAKit 人神经丝蛋白(NF)试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanactivatedproteinC,APC试剂盒人活化蛋白C(APC)试剂盒规格:96T/48T
脂质过氧化物反式十八碳四烯酸(cis-parinaricacid)ELISA定量测定试剂盒48/96次
MouseAngiotensinconveingenzyme,ACEELISAKit小鼠血管紧张素转化酶(ACE)试剂盒规格:96T/48T
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