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更新时间:2024-10-29
大鼠肝动脉内皮细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
肝动脉组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 内皮细胞样 | YS-01X7139 |
细胞简介:
大鼠肝动脉内皮分离自肝动脉组织;在胚胎期,肝脏有3条动脉供血,分别来源于胃左动脉、腹腔动脉和肠系膜上动脉,这3条动脉分别的不同部位。出生后,一般保留一条动脉,大部分为起源于腹腔动脉的动脉,由其分出左、右肝动脉供应左、右半肝。偶尔也可见起源于胃左动脉的动脉或起源于肠系膜上动脉的动脉。但也有2条动脉并存的情况,如起源于腹腔动脉和起源于胃左动脉(25%),起源于腹腔动脉和起源于肠系腊上动脉(10%),而起源于胃左动脉和起源于肠系膜上动脉的2条动脉同时存在的情况比较少见。此外,还有5%像胚胎期一样,3条动脉同时存在。这种起源于腹腔动脉以外的肝动脉称为迷走肝动脉,如果肝脏没有起源于腹腔动脉的动脉供血时,此种异位起源的肝动脉称替代动脉,如果在常见肝动脉类型外,还有一支这种异位起始的动脉的一部分血流,这种肝动脉称副肝动脉。肝动脉内皮细胞是衬于肝动脉内表面的单层扁平上皮,在炎症时高表达黏附分子,与血流中白细胞表面黏附分子相互作用,从而介导白细胞穿越血管壁,亦属一类非专职抗原提呈细胞。它们吞噬异物、细菌、坏死和衰老的组织,还参与集体免疫活动,包括:①血管收缩及血管舒张,从而控制血压;②凝血(血栓形成及纤维蛋白溶解);③动脉硬化;④血管生成;⑤炎症及肿胀(浮肿);⑥内皮细胞亦控制一些物质,如白血球进出血管。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠肝动脉内皮采用混合酶消化法结合差速贴壁法,并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠肝动脉内皮经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件 PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
蔗糖合成酶(SS)试剂盒 可见分光光度法 50管/48样
蔗糖0酸合成酶(SPS)试剂盒 可见分光光度法 50管/48样
海藻糖含量试剂盒 可见分光光度法 50管/48样
蔗糖酶试剂盒 可见分光光度法 50管/48样
植物过氧化物酶(POD)试剂盒
Human ai ribosomal P protein aibody (ARPA/Rib-P) ELISA Kit 人抗核糖体P蛋白抗体(ARPA/Rib-P)试剂盒
PorcineapoproteinA1,apo-A1ELISAKit 猪载脂蛋白A1(apo-A1)试剂盒 进口分装
CLIAKitforAECA(Mouseai-endothelialcellaibody)ELISAKit小鼠抗内皮细胞抗体
血液氧化型(GSSG)浓度高效液相色谱定量试剂盒50次
MouseSomalcellderivedfactor1β,SDF-1βELISAKit小鼠基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)试剂盒
转移生长因子诱导核蛋白1抗体
玻璃粘连蛋白抗体
CNDP1重组人 CNDP1 蛋白 (His 标签) Protein
硫氧还蛋白还原酶1(TrxR1)重组蛋白 Recombinant Thioredoxin Reductase 1 (TrxR1)
RAB6A重组人 Rab6 / Rab GTPases / RAB6A 蛋白 (His 标签) Protein
ACPL2 Protein Human 重组人 ACPL2 蛋白 (His 标签)
NA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/Thailand/1 (KAN-1) /2004) 神经酸酶 (Neuraminidase / NA) (His 标签)
硫氧还蛋白还原酶1(TrxR1)重组蛋白 Recombinant Thioredoxin Reductase 1 (TrxR1)
ACPL2 Protein Human 重组人 ACPL2 蛋白 (His 标签)
CNDP1重组人 CNDP1 蛋白 (His 标签) Protein
NA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/Thailand/1 (KAN-1) /2004) 神经酸酶 (Neuraminidase / NA) (His 标签)
RAB6A重组人 Rab6 / Rab GTPases / RAB6A 蛋白 (His 标签) Protein
大鼠肝动脉内皮细胞小鼠内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)ELISA 试剂盒
Rat basic fibroblast growth factor 9 (bFGF-9) ELISA Kit 大鼠碱性成纤维细胞生长因子9(bFGF-9)试剂盒
HumanelonginELISAKit 人延伸蛋白(elongin)试剂盒 进口分装
HumanADisiegrinAndMetalloprotease9,ADAM9试剂盒人解整合素样金属蛋白酶9(ADAM9)试剂盒
正常女性人体肝组织S9组分(5毫克/毫升)500微升
Mouseai-EndomysialAibodyIgA,EMAIgAELISAKit小鼠抗肌内膜抗体IgA(EMAIgA)试剂盒
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