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更新时间:2024-10-28
大鼠多巴胺神经元细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
脑组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 神经元细胞样 | YS-01X7624 |
细胞简介:
大鼠多巴胺神经元分离脑组织;多巴胺神经元,即:胺能神经元,主要指含多巴胺的神经元,其细胞体主要分布在黑质、脚间核和丘脑下部等处。在这些区域多巴胺含量很高。多巴胺在机体内合成时以为原料。脑内的多巴胺主要是由黑质细胞来合成,这些多巴胺参与锥体外系统的活动,与躯体运动机能有密切关系。脑内多巴胺代谢失常时,可引起震颤性麻痹(帕金森震颤)。多巴胺(Dopamine),是NA的前体物质,是下丘脑和脑垂体腺中的一种关键神经递质,中枢神经系统中多巴胺的浓度受精神因素的影响,神经末梢的GnRH和多巴胺间存在着轴突联系并相互作用,以及多巴胺有抑制GnRH分泌的作用。中脑的神经原物质多巴胺(Dopamine),则直接影响人们的情绪。从理论上来看,增加这种物质,就能让人兴奋,但是它会令人上瘾。多巴胺在前脑和基底神经节(Basal Ganglia)出现,基底神经节负责处理恐惧的情绪,但由于多巴胺的缘故,取代了恐惧的感觉,因此有很多人的上瘾行为,都是因多巴胺而起的。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠多巴胺神经元采用消化法、神经元专用培养基培养筛选结合化学试剂抑制法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠多巴胺神经元经TH免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件 PLL(0.1mg/ml)
培养基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 神经元细胞样
传代特性 属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
小鼠髓过氧化物酶 英文名称: Mouse Myeloperoxidase 规格: 英文缩写: MPO
小鼠巨噬细胞趋化蛋白-1 英文名称: monocyte chemotactic protein 1 规格: 英文缩写: MCP-1
小鼠巨噬细胞趋化蛋白-3 英文名称: monocyte chemotactic protein 3 规格: 英文缩写: MCP-3
小鼠M-能受体结合力 英文名称: M—cholinoceptor binding capacity 规格: 英文缩写: MCBC
小鼠糖蛋白130(gp130)ELISA 试剂盒 96T/48T
Rat leinizing hormone releasing hormone (LHRH) ELISA Kit 大鼠黄体生成素释放激素(LHRH)试剂盒
HumanCytochromeP450c21/21-hydroxylase,CYP21AELISAKit 人细胞色素P450c21A/21-羟化酶(CYP21A)试剂盒 96T/48T 进口分装
cit瓜规格:96T/48T
载玻片细胞钙ATP酶PMCA蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次
Mouseeosinophilcationicprotein,ECPELISAKit小鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)试剂盒规格:96T/48T
脂肪酸合成酶单克隆抗体
VAC14蛋白抗体
WFDC2重组狗 WAP5 / WFDC2 / HE4 蛋白 (Fc 标签) Protein
OAT-1 (Organic anion transporter 1 0.5mgOAT-1 (Organic anion transporter 1)human 阴离子转运蛋白-1(人源)
TRIB2重组人 TRIB2 / TRB2 蛋白 Protein
CHN1 Protein Human 重组人 CHN1 / Chimerin 1 蛋白
CHL1 Protein Mouse 重组小鼠 CHL-1 蛋白
OAT-1 (Organic anion transporter 1 0.5mgOAT-1 (Organic anion transporter 1)human 阴离子转运蛋白-1(人源)
CHN1 Protein Human 重组人 CHN1 / Chimerin 1 蛋白
WFDC2重组狗 WAP5 / WFDC2 / HE4 蛋白 (Fc 标签) Protein
CHL1 Protein Mouse 重组小鼠 CHL-1 蛋白
TRIB2重组人 TRIB2 / TRB2 蛋白 Protein
大鼠多巴胺神经元细胞小鼠神经生长导向因子(Slit2) ELISA 试剂盒
Mueller tube inhibitory substance / ai Mueller tube hormone (MIS/AMH) ELISA Kit 人缪勒管抑制物质/抗缪勒管激素(MIS/AMH)试剂盒
HumanN-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKPELISAKit 人N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯(AcSDKP)试剂盒 96T/48T 进口分装
GoatBeta-Endorphin,β-EP试剂盒山羊β内啡肽(β-EP)试剂盒规格:96T/48T
真菌/酵母黑色素含量比色法定量试剂盒20次
MouseCollageypeⅡ,ColⅡELISAKit小鼠Ⅱ型胶原(ColⅡ)试剂盒规格:96T/48T
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
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