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更新时间:2024-10-27
大鼠骨内膜间充质干细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
股骨、胫骨组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 不规则细胞 | YS-01X7495 |
细胞简介:
大鼠骨内膜间充质干分离自股骨、胫骨;骨内膜是一层致密结缔组织膜,覆盖在骨的表面(关节面除外),新鲜骨内膜呈粉红色,含有丰富的血管、神经和成骨细胞。此外,附着于骨的肌腱、韧带于附着部位都与骨内膜编织在一起。因而骨内膜与骨质结合甚为牢固。骨内膜富含血管、神经,通过骨质的滋养孔分布于骨质和骨髓。骨内膜分内、外两层,外层主要是粗大的胶原纤维束,部分纤维穿入骨质,使骨内膜固定于骨面;内层疏松,含成骨细胞和破骨细胞(分别具有产生新骨质和改建骨的功能)。骨髓腔和骨松质的网眼也衬着一层菲薄的结缔组织膜,叫做骨膜。骨内膜的内层和骨膜有分化成骨细胞和破骨细胞的能力,以形成新骨质和破坏、改造已生成的骨质,所以对骨的发生、生长、修复等具有重要意义。骨内膜间充质干细胞是一种具有高度自我更新能力和多向分化潜能的干细胞,可以向骨、软骨、肌组织、皮肤、脂肪、神经等多种组织分化,因此可以作为组织工程中的种子细胞。骨内膜间充质干细胞的体外培养条件要求较高,在培养过程中,受贴壁时间、种植密度、血清含量、培养温度和培养基pH值等条件的影响。
方法简介:
见说明
质量检测:
本公司生产的大鼠骨内膜间充质干采用冲洗骨髓、消化骨内膜、差速贴壁法结合培养基筛选制备而来,细胞总量约为5×10^5cells/瓶;经CD90/CD44、CD34/CD45免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
DMEM-F12、FBS、间充质干细胞生长添加剂、Glutamine、Penicillin、Streptomycin等
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
小鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)检测试剂盒 96T/48T
小鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)检测试剂盒 96T/48T
小鼠糖原合成酶激酶(GSK)检测试剂盒 96T/48T
小鼠糖皮质类固醇受体(GR)检测试剂盒 96T/48T
小鼠糖原0酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human melatonin sulfate (MS) ELISA Kit 人褪黑色素(MS)检测试剂盒
HumanLipoarabinomannan,LAMELISAKit 人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)检测试剂盒 96T/48T 进口分装
Chickeni-iodothyronine,T3检测试剂盒鸡三甲状腺原(T3)检测试剂盒规格:96T/48T
载玻片细胞TNFALPHA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次
MouseEsiol,E3ELISAKit小鼠雌三醇(E3)检测试剂盒规格:96T/48T
血红蛋白ε抗体
PE-Cy5标记小鼠CD90单克隆抗体
HA重组甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
PEPT1 (Peptide-transporters 1 0.5mgPEPT1 (Peptide-transporters 1) 肠道肽转运蛋白(小肽转运蛋白)多肽
DCN重组人 Decorin / DCN / SLRR1B 蛋白 Protein
CGB5 Protein Human 重组人 CGB5 蛋白
CD34 Protein Human 重组人 CD34 蛋白
PEPT1 (Peptide-transporters 1 0.5mgPEPT1 (Peptide-transporters 1) 肠道肽转运蛋白(小肽转运蛋白)多肽
CGB5 Protein Human 重组人 CGB5 蛋白
HA重组甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
CD34 Protein Human 重组人 CD34 蛋白
DCN重组人 Decorin / DCN / SLRR1B 蛋白 Protein
大鼠骨内膜间充质干细胞猪肌球蛋白轻链0酸酶(MLCP)ELISA 试剂盒
Neuroophic factor glial cell line derived (GDNF) ELISA Kit 人胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)检测试剂盒
Porcineacetylcholine,ACHELISAKit 猪乙酰(ACh)检测试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforAlphaNAG(MouseAlphaN-acetylglucosaminidase)ELISAKit小鼠αN已酰氨基葡糖苷酶
血液离子(K)浓度化学比色法定量检测试剂盒20次
PlaIndole-3-aceticacid,IAAELISAKit植物吲哚乙酸(IAA)检测试剂盒规格:96T/48T
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
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