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访问量:792
更新时间:2024-09-12
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.温浴
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.白介素27ELISA试剂盒为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
试剂和样本的控制方法:
一、试剂
1.试剂的选择:国家明确要求要采用批批检定的形式对ELISA试剂严格把关,我司严格按照国家标准进行,已获得国家承认的“三证”,每一个产品都有对应的批号,只要客户提前下单,我们就能为您提供新批次的产品,不必担心会有过期的试剂。我司的试剂,值得您选择。
2.试剂的准备:先将试剂盒先从冰箱中拿出来,在室温下放置20-30 min后,再进行测定,使试剂盒在使用前与室温平衡,这样做的目的能使反应微孔内的温度较快地达到所需的温度,以满足后面的测定需求。
二、样本
1.内源性干扰因素:包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异免疫球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体等;
类风湿因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②标本用联有热变性IgG的固相吸附剂处理;
③检测抗原时,可用加入到标本稀释液中使RF降解;
补体的控制方法:
①用EDTA稀释标本;
②56℃ 30 min加热血清使C1q灭活;
2.外源性干扰因素:包括标本溶血、细菌污染、保存时间过长或凝固不全等;
控制方法:采血时规范操作,采集的血液勿用力震荡,以防溶血;收集标本时采用无菌试管,经检测后再低温冻存;保存时间不宜过久,检测时尽量采用新鲜标本;对于凝固不全的血标本可适当加入抗凝剂,并放入37℃水中1 h,待充分凝固后再离心分离血清。
操作步骤:
1)使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2)根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
3)加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5)每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7)每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
8)取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9)在450nm波长处测定各孔的OD值。
具有如下优点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、性价比非常好,节省实验经费。
anti- AFP antibody大鼠卵巢癌标志物CA125ELISA试剂盒
anti- AGA antibody大鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)ELISA试剂盒
anti- AGAP2 antibody大鼠骨保护素(OPG)ELISA试剂盒
anti- AGBL3 antibody大鼠骨保护素配体(OPGL)ELISA试剂盒
anti- AGBL5/CCP5 antibody大鼠骨桥素(OPN)ELISA试剂盒
anti- AGER antibody大鼠骨粘连蛋白(ON)ELISA试剂盒
anti- AGER antibody大鼠破骨细胞分化因子(ODF)ELISA试剂盒
anti- AGFG1 antibody大鼠骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA试剂盒
anti- AGFG2 antibody大鼠孤腓肽(OFQ/N)ELISA试剂盒
anti- AGGF1 antibody大鼠阿立新A(Orexin A)ELISA试剂盒
anti- Aggrecan antibody大鼠抑瘤素M(OSM)ELISA试剂盒
anti- AGO2 antibody大鼠网膜素(omentin)ELISA试剂盒
anti- AGPAT1 antibody大鼠核因子κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)ELISA试剂盒
anti- AGPAT3 antibody大鼠核因子κB(NF-κB)ELISA试剂盒
anti- AGPAT6 antibody大鼠Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒
白介素27ELISA试剂盒小鼠 IgA (mouse IgA)Human CMA1(Chymase) ELISA Kit
Human KISS1(Metastasis-suppressor KiSS-1) ELISA Kit
小鼠 IgG(mouse IgG)Human 4-HNE(4-Hydroxynonenal) ELISA Kit
Human ADAMTS9(A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 9) ELISA Kit
小鼠类胰岛素样生长因子 -1 (mouse IGF-1)Human UCP2(Mitochondrial uncoupling protein 2) ELISA Kit
Human UCP1(Mitochondrial brown fat uncoupling protein 1) ELISA Kit
小鼠 IGF-II (Mouse IGF-II) ELISA KitHuman LRP1(Prolow-density lipoprotein receptor-related protein 1) ELISA Kit
Human COQ10B(Coenzyme Q-binding protein COQ10 homolog B, mitochondrial) ELISA Kit
小鼠白介素 -1 a (mouse IL-1 a )Human QPCTL(Glutaminyl-peptide cyclotransferase-like protein) ELISA Kit
Human SELENBP1(Selenium-binding protein 1) ELISA Kit
小鼠白介素 -1 b (mouse IL-1 b )Human CCR3(C-C chemokine receptor type 3) ELISA Kit
Human DMP1(Dentin matrix acidic phosphoprotein 1) ELISA Kit
mouse IL-1R ELISA KitHuman PION(Gamma-secretase-activating protein) ELISA Kit
Human ALAD(Delta-aminolevulinic acid dehydRatase) ELISA Kit
小鼠白介素 -1RA( 小鼠 IL-1ra)Human FECH(Ferrochelatase, mitochondrial) ELISA Kit
Human QPCT(Glutaminyl-peptide cyclotransferase) ELISA Kit
小鼠白介素 -2 (mouse IL-2)Human DDOST(Dolichyl-diphosphooligosaccharide--protein glycosyltransferase 48 kDa subunit) ELISA Kit
Human PDPN(Podoplanin) ELISA Kit
小鼠白介素 -3 (mouse IL-3)Human MCL1(Induced myeloid leukemia cell differentiation protein Mcl-1) ELISA Kit
Human ADAMTS5(A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 5) ELISA Kit
小鼠白介素 -4 (mouse IL-4)Human MEFV(Pyrin) ELISA Kit
Human DNMT1(DNA(cytosine-5)-methyltransferase 1) ELISA Kit
小鼠白介素 -5 (mouse IL-5)Human IL17B(Interleukin-17B) ELISA Kit
Human TLN1(Talin-1) ELISA Kit
小鼠白介素 -6 (mouse IL-6)Human MRC2(C-type mannose receptor 2) ELISA Kit
Human IFNE(Interferon epsilon) ELISA Kit
小鼠白介素 -7(mouse IL-7)Human GOT1L1(Putative aspartate aminotransferase, cytoplasmic 2) ELISA Kit
Human TK1(Thymidine kinase, cytosolic) ELISA Kit
小鼠白介素 -10 (mouse IL-10)Human 5-HETE(5-Hydroxyeicosatetraenoic Acid) ELISA Kit
Human LCAT(Phosphatidylcholine-sterol acyltransferase) ELISA Kit