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更新时间:2024-11-05
大鼠股骨头微血管内皮细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
骨 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 内皮细胞样 | YS-01X8230 |
细胞简介:
大鼠股骨头微血管内皮分离自骨组织;股骨头(caput femoris)呈圆形,约占一圆球的2/3,其上为关节软骨所覆盖,在其顶部微后有一小窝,称为股骨头凹,为股骨头韧带附着处,股骨头可由此获得少量血供。股骨头骨髓的微血管结构为珊瑚状,后毛细血管微动脉与微静脉部分膨大、迂曲、互相缠绕;骨微血管内皮细胞构成了骨内微血管的内衬,与骨内其他成分联系密切,参与了许多骨的病理生理过程在骨吸收新骨的形成血管再生营养物质转运骨内代谢产物输出及维持骨内微环境平衡方面具有重要作用。
方法简介:
实验室分离的大鼠股骨头微血管内皮采用混合胶原酶消化制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的大鼠股骨头微血管内皮经CD31免疫荧光鉴定,细胞纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件:PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基:基础培养基,含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:内皮细胞样
传代特性:可传1-3代左右;2代以内状态优良
消化液:0.25%,Accutase
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
大鼠股骨头微血管内皮体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
小鼠蛋白激酶A(PKA)试剂盒 96T/48T
小鼠胆囊收缩素8(CCK-8)试剂盒 96T/48T
小鼠胆囊收缩素/肠促肽(CCK)试剂盒 96T/48T
小鼠酯转移蛋白(CETP)试剂盒 96T/48T
小鼠结肠癌抗原(CCA)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human breast cancer susceptibility protein 1 (BFAA-1) ELISA Kit 人癌易感蛋白1(BFAA-1)试剂盒
HumandysophinELISAKit 人肌养蛋白(dysophin)试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanai-cenolandcenosomeaibody,ACA试剂盒人抗中性粒/中心体抗体(ACA)试剂盒规格:96T/48T
植物还原型(GSH)浓度比色法定量试剂盒50次
Humanα-Actinin3,ACTN-3ELISAKit人α-辅肌动蛋白3(ACTN-3)试剂盒规格:96T/48T
巴豆酰组蛋白H2B重组兔单克隆抗体
酪激酶B单克隆抗体
RELT重组人 RELT / TNFRSF19L 蛋白 (His & Fc 标签) Protein
胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP4)重组蛋白 Recombinant Insulin Like Growth Factor Binding Protein 4 (IGFBP4)
HA重组甲型流感 H5N1 (A/chicken/Egypt/2253-1/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
EFNB1 Protein Human 重组人 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白
C. PERFRINGENS NA Protein C.perfringens 重组产气荚膜梭菌 神经酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性)
胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP4)重组蛋白 Recombinant Insulin Like Growth Factor Binding Protein 4 (IGFBP4)
EFNB1 Protein Human 重组人 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白
RELT重组人 RELT / TNFRSF19L 蛋白 (His & Fc 标签) Protein
C. PERFRINGENS NA Protein C.perfringens 重组产气荚膜梭菌 神经酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性)
HA重组甲型流感 H5N1 (A/chicken/Egypt/2253-1/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
大鼠股骨头微血管内皮细胞大鼠白细胞介素2(IL-2)试剂盒 ,英文名: IL-2 ELISA Kit
Mouse macrophage inflammatory protein 2 (MIP-2) ELISA Kit 小鼠巨噬细胞性蛋白2(MIP-2)试剂盒
Mouseperoxisomeproliferatorsactivatorreceptorsalpha,PPAR-αELISAKit 小鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHumanOpacity-associatedproteins,OPAsELISAKit人不透光相关蛋白
同位素核酸蛋白结合反应试剂盒20次
sAIL大鼠可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行
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