服务热线
021-59989018
产品简介:
产品型号:
厂商性质:经销商
访问量:862
更新时间:2024-11-05
大鼠骨髓造血干细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
骨髓 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 圆形 | YS-01X8233 |
细胞简介:
大鼠骨髓造血干分离自骨髓;骨髓是机体的造血组织,位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种:红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用,白细胞能杀灭与抑制各种病原体,包括细菌、病毒等;某些淋巴细胞能制造抗体。因此,骨髓不但是造血器官,它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨质间的网眼中,是一种海绵状的组织,能产生血细胞的骨髓略呈红色,称为红骨髓。出生时,红骨髓充满全身骨髓腔,随着年龄增大,脂肪细胞增多,相当部分红骨髓被黄骨髓取代,最后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。造血干细胞具有自我更新能力并能分化为各种血细胞的前提细胞,最终生成各种血细胞成分,包括红细胞,白细胞和血小板。造血干细胞需要根据机体的生理需求适时的补充血液系统各个成熟细胞组分。同时在损伤、炎症等应激状态下,造血干细胞也扮演着调节和维持体内血液系统各个细胞组分的生理平衡的角色。临床治疗中,造血干细胞移植广泛应用于血液系统疾病以及自身免疫疾病,在其它实体瘤的治疗中,比如淋巴瘤,生殖细胞瘤,乳腺癌,小细胞肺癌,主要应用于常规治疗失败或复发难治以及具有不良预后因素的患者。造血干细胞以不对称有丝分裂方式进行增殖,一个干细胞分裂产生两个子细胞,一个分化为造血祖细胞,另一个则保持干细胞特征。造血干细胞在不断体外培养产生大量造血祖细胞同时,保持自己既不增殖也不分化。体外培养微环境合适,造血干细胞可持续维持培养 60 天左右。 造血干细胞体外增殖培养需要基质细胞滋养(滋养层细胞),缺少滋养层细胞不增殖,无法长期培养,本产品为收集培养好的造血干悬浮细胞灌装发货,不包含滋养层,因此收货后建议尽快实验。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
实验室分离的大鼠骨髓造血干采用冲洗骨髓、密度梯度离心、差速贴壁法结合培养基筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的大鼠骨髓造血经CD34免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基:含FBS、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:悬浮
细胞形态:圆形
传代特性:不建议传代
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
大鼠骨髓造血干体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的优良培养状态。
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
三乙酸 100g
ichloroaceticAcid 500g
N-三(羟甲基)甲基甘酸 500g
icine 100g
豚鼠免疫球蛋白G(IgG)试剂盒 ,英文名: IgG ELISA Kit
Human low density lipoprotein receptor (LDLR) ELISA Kit 人低密度脂蛋白受体(LDLR)试剂盒
MonkeyhighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKit 猴超敏C反应蛋白(hs-CRP)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforBigETELISAKit大鼠大内皮素
细菌尿素酶(UREASE)活性化学发光法定量试剂盒20次
rabbitleukemiainhibitoryfactorreceptor,LIFRELISAKit兔子白血病抑制因子受体(LIFR)试剂盒规格:96T/48T
半胱脱硫酶NFS1抗体
淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒Z蛋白抗体
TNF重组雪貂 TNF-alpha / TNFA 蛋白 Protein
OXR (Orexin receptor 0.5mgOXR (Orexin receptor) 食欲素受体(多肽)
SERPINB2重组人 SerpinB2 / PAI-2 蛋白 (GST 标签) Protein
IL17RB Protein Human 重组人 IL17BR / IL17RB / IL-17 Receptor B 蛋白 (Fc 标签)
SERPINA1A Protein Mouse 重组小鼠 Alpha 1 Antitrypsin / SerpinA1a 蛋白 (Fc 标签)
OXR (Orexin receptor 0.5mgOXR (Orexin receptor) 食欲素受体(多肽)
IL17RB Protein Human 重组人 IL17BR / IL17RB / IL-17 Receptor B 蛋白 (Fc 标签)
TNF重组雪貂 TNF-alpha / TNFA 蛋白 Protein
SERPINA1A Protein Mouse 重组小鼠 Alpha 1 Antitrypsin / SerpinA1a 蛋白 (Fc 标签)
SERPINB2重组人 SerpinB2 / PAI-2 蛋白 (GST 标签) Protein
大鼠骨髓造血干细胞大鼠白细胞介素1α(IL-1α)试剂盒 ,英文名: IL-1α ELISA Kit
Lens culinaris agglinin (LCA) ELISA Kit 扁豆凝集素(LCA)试剂盒
Mousegrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin,GHRP-GhrelinELISAKit 小鼠生长激素释放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHumanNon-PhosphorylatedInsulin-likegrowthfactorbindingprotein1ELISAKit人未0酸化类胰岛素生长因子结合蛋白-1
同位素真菌/酵母细胞蛋白核酸结合凝胶迁移电泳分析试剂盒20次
ELISAKitsICAM-1大鼠可溶性细胞间粘附分子1
上一篇:大鼠关节囊成纤维细胞