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更新时间:2024-11-07
小鼠气管软骨细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
气管 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X8525 |
细胞简介:
小鼠气管软骨分离自气管组织;气管(Trachea),呼吸器官的一部分;为后壁略平的圆筒型管状。上端平第六颈椎下缘,与环状软骨相连;向下至第四、五胸椎体(相当胸骨角平面)交界处,分左、右主支气管,分叉处称为气管杈。气管主要由14-16个半环状软骨构成,有弹性,软骨为“C"字形的软骨环,缺口向后,各软骨环以韧带连接起来,环后方缺口处由平滑肌和致密结缔组织连接,保持了持续张开状态。软骨由软骨细胞和细胞间质组成。软骨内的基质呈凝胶状态,具有较大韧性。软骨是以支持作用为主的结缔组织。软骨内不含血管和淋巴管,营养物由软骨膜内的血管中渗透到细胞间质中,再营养骨细胞。根据细胞间质的不同可把软骨分为3种,即透明软骨、弹性软骨和纤维软骨。透明软骨的基质是由胶原纤维、原纤维和周围无定形的基质组成。在胚胎时期有临时支架作用,后来这种作用被骨代替。成人的透明软骨主要分布在气管和支气管壁中、肋骨的胸骨端和骨的表面(关节软骨)。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
实验室分离的小鼠气管软骨采用-胶原酶联合消化法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的小鼠气管软骨经Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每3-4天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:梭形、多角形
传代特性:可传3代左右
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
小鼠气管软骨体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
兔血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1 英文名称: Rabbit Lctin like oxLDL Receptor 1 英文缩写: LOX-1
兔脂氧合酶同工酶 英文名称: Rabbit Lipoxygenase Isozymes 英文缩写: LOXI
兔基质金属蛋白酶 1 英文名称: Rabbit Maix Metalloproteinase 1 英文缩写: MMP-1
兔基质金属蛋白酶 2 英文名称: Rabbit Maix Metalloproteinase 2 英文缩写: MMP-2
肝肠钙粘连蛋白重组兔单克隆抗体
生物钟KAT13D蛋白抗体
CD63重组大鼠 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白 (Fc 标签) Protein
CT (Calcitonin 0.5mgCT (Calcitonin ) 降钙素(抗原)
FCER2重组人 CD23 / FCER2 蛋白 Protein
H1F0 Protein Human 重组人 H1F0 / Histone H1 蛋白
PCSK9 Protein Mouse 重组小鼠 PCSK9 / NARC1 蛋白
CT (Calcitonin 0.5mgCT (Calcitonin ) 降钙素(抗原)
H1F0 Protein Human 重组人 H1F0 / Histone H1 蛋白
CD63重组大鼠 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白 (Fc 标签) Protein
PCSK9 Protein Mouse 重组小鼠 PCSK9 / NARC1 蛋白
FCER2重组人 CD23 / FCER2 蛋白 Protein
小鼠αN已酰基葡糖苷酶(αNAG)ELISA pcr检测试剂盒
Rat aquaporin 3 (AQP-3) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白3(AQP-3)试剂盒
Humanplacealactogen,HPLELISAKit 人胎盘催乳素(HPL)pcr检测试剂盒分装
HumanChromogranin,CgA试剂盒人嗜铬蛋白A(CgA)试剂盒规格:96T/48T
总脂肪酶(lipase)定量试剂盒50次
Humansalivaryductaoaibody,SDAELISAKit人抗唾液腺导管组织抗体(SDA)试剂盒规格:96T/48T
小鼠气管软骨细胞大鼠组蛋白H2A(H2A)试剂盒 ,英文名: H2A ELISA Kit
Mouse ai thyroglobulin aibody (ATGA/TGAB) ELISA Kit 小鼠抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA/TGAB)试剂盒
MouseIerleukin1receptoraagonist,IL-1raELISAkit 小鼠白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)pcr检测试剂盒分装
CLIAKitforHumanlymphocytefunctionassociatedaigen2,LFA-2ELISAKit人淋巴细胞功能相关抗原2
土壤元素荧光定量试剂盒20次
ELISAKitdsDNA大鼠抗双链DNA抗体/天然DNA抗体