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更新时间:2024-11-04
小鼠神经干细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
脑组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 球形 | YS-01X7436 |
细胞简介:
小鼠神经干分离自脑皮层组织;大脑分左右两个半球,大脑皮质(灰质)覆盖着每个大脑半球的大部分,它是神经元胞体集中的地方。内部则是由神经纤维或髓鞘构成的白质。每一个半球都有三个面,即外侧面(约占整个皮质面积的1/3)、内侧面和底面(占2/3的面积);半球表面有很多深浅不等的沟或裂,沟或裂之间的隆起叫回,它们大大增加了大脑的表面积;大脑外侧面重要的沟、裂有大脑外侧裂、顶枕裂和中央沟。由于三沟裂之界隔,使大脑皮质组分为额叶、顶叶、颞叶、枕叶四大部分。神经干细胞具有分化为神经神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的能力,能自我更新,并足以提供大量脑组织细胞的细胞群。神经干细胞是一类具有分裂潜能和自更新能力的母细胞,它可以通过不对等的分裂方式产生神经组织的各类细胞。需要强调的是,在脑脊髓等所有神经组织中,不同的神经干细胞类型产生的子代细胞种类不同,分布也不同。神经干细胞作为干细胞的一种,它具有其它所有干细胞的基本特征:具有自我维持和自我更新能力,具有多种分化潜能,具有分化为本系统大部分类型细胞的能力,这种自我更新和分化潜能可以维持相当长的时间甚至终生,对损伤和疾病具有反应能力。神经干细胞在疾病、损伤状态下具有增殖、迁移,并向神经细胞、星形胶质细胞和少突胶质细胞分化的能力,已成为神经系统损伤修复和再生研究的热点,体外建立稳定的神经干细胞培养模型是其基础和临床应用的前提。神经干细胞在培养3-4d后,可形成神经球,神经球在培养基中呈悬浮生长,予以更换半量培基,1周后用吸管轻柔吹打球形克隆成为小的神经球和单细胞悬液,将部分细胞接种到新的培养瓶中,2×105个细胞/瓶,每7-10d传代1次,每隔3d离心更换半量培养基1次,培养条件不变。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
公司实验室分离的小鼠神经干采用消化后差速贴壁,结合神经干细胞专用培养基培养筛选制备而来,总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的小鼠神经干经Nestin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基 含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 悬浮
细胞形态 球形
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%,Accutase
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
血清低密度脂蛋白(LDL)测试盒 Two semi test case
血清高密度脂蛋白(HDL)测试盒 HCV test kit
葡萄糖(Glu)测试盒 Surface aigen (enzymatic method) test case
(半自动/手工) A test box
小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC) ELISA 试剂盒 96T/48T
Human ai neuophil / cenosome aibody (ACA) ELISA Kit 人抗中性粒/中心体抗体(ACA)试剂盒
Humanai-OJ-aibody,OJ/IleRSELISAKit 人OJ抗体/抗异亮氨酰NA合成酶抗体(OJ/IleRS)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforABeta1-42(Humanamyloidbetapeptide1-42)ELISAKit人β淀粉样蛋白1-42
乙醇福尔马林固着液(Formalin-Alcoholic)50毫升
MouseN-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKPELISAKit小鼠N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯(AcSDKP)试剂盒规格:96T/48T
PRDM锌指转录因子PRDM4抗体
ISLR2蛋白抗体
EFNA5重组小鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 标签)(Fc 标签) Protein
AQP-2 (aquaporin Protein-2 0.5mgAQP-2 (aquaporin Protein-2) 水通道蛋白-2(抗原)
IL36A重组人 IL1F6 / IL36A 蛋白 Protein
CCL17 Protein Human 重组人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白
CD79B Protein Rat 重组大鼠 CD79B / B29 蛋白
AQP-2 (aquaporin Protein-2 0.5mgAQP-2 (aquaporin Protein-2) 水通道蛋白-2(抗原)
CCL17 Protein Human 重组人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白
EFNA5重组小鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 标签)(Fc 标签) Protein
CD79B Protein Rat 重组大鼠 CD79B / B29 蛋白
IL36A重组人 IL1F6 / IL36A 蛋白 Protein
小鼠神经干细胞大鼠肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)试剂盒 ,英文名: SP-A ELISA Kit
Porcine soluble P selectin (sP-S 猪可溶性P选择素(sP-S
猪特定基因序列(Porcine)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
CLIAKitforMAP-2(Humanmicrotubule-associatedprotein2)ELISAKit人微管相关蛋白2
体液氧化应激活性氧(ROS)荧光测定试剂盒(过氧亚硝基阴离子)20次
ELISAKitIGFBP-3胰岛素样生长因子结合蛋白3
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