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更新时间:2024-11-05
人筋膜成纤维细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
筋膜 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 成纤维细胞样 | YS-01X8297 |
细胞简介:
人筋膜成纤维分离自筋膜组织;筋膜,解剖结构名。指肌肉的坚韧部分。附于骨节者为筋,包于肌腱外者为膜。是联络关节、肌肉,主 司运动的组织。为肝所主,并赖肝血的滋养。筋膜是一类结缔组织,结缔组织除了筋膜还有其他表现的形式,如腱、韧带、腱膜和疤痕组织。在不同的地方结缔组织也有着不同的名称:脑和脊髓周围的是脑膜;骨周围是骨膜;心脏周围是心包;腹腔内表面的是腹膜;在皮下层包围整个身体和封闭肌肉和肌群的叫筋膜。筋膜位于肌肉的表面,分为浅筋膜和深筋膜两种。(1)浅筋膜位于皮下,又称皮下筋膜,由疏 松结缔组织构成,其内含有脂肪、浅静脉、皮神经以及浅淋巴结和淋巴管等。脂肪的多少因身体部位、性别和营养状况不同。临床常作的皮 下注射,即将药液注入浅筋膜内。(2)深筋膜 位于浅筋膜深面,又称固有筋膜,由致密结缔组织构成,遍于全身且互相连续。深筋膜包被 肌或肌群、腺体、大血管和神经等形成筋膜鞘。四肢的深筋膜。伸入肌群之间与骨相连,分隔肌群,称肌间隔。成纤维细胞是结缔组织 的主要细胞成分,细胞呈梭形或扁的星状,具有突起。刚分离的成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
实验室分离的人筋膜成纤维采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的人筋膜成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基:基础培养基,含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传3代左右
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
人筋膜成纤维体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
兔子中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)试剂盒 96T/48T
兔子脂联素(ADP)试剂盒 96T/48T
兔子脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)试剂盒 96T/48T
兔子孕激素/孕(PROG)试剂盒 96T/48T
小鼠补体片段3b受体(C3bR)ELISA 试剂盒 96T/48T
Rat prostate specific aigen (PSA) ELISA Kit 大鼠前列腺特异性抗原(PSA)试剂盒
HumanUrokinase-typePlasminogenActivatorReceptor,PLAUR/uPARELISAkit 人型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanBoneMorphogeneticProtein6,BMP-6试剂盒人骨形成蛋白6(BMP-6)试剂盒规格:96T/48T
植物总糖蛋白树脂法化试剂盒5次
HumanSeptokinase,SKELISAKit人链激酶(SK)试剂盒规格:96T/48T
INTS1蛋白抗体
生长因子受体结合蛋白2抗体
IL17F重组大鼠 IL17F / IL-17F 蛋白 Protein
Collagen III (Anti-Collagen Type III 0.5mgCollagen III (Anti-Collagen Type III ) 抗Ⅲ型胶原抗原(Collagen Ⅲ Ⅲ型胶原)
KDR重组人 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 蛋白 Protein
FUT8 Protein Human 重组人 FUT8 蛋白 (aa 68-575, His 标签)
BST1 Protein Mouse 重组小鼠 CD157 / BST1 蛋白
Collagen III (Anti-Collagen Type III 0.5mgCollagen III (Anti-Collagen Type III ) 抗Ⅲ型胶原抗原(Collagen Ⅲ Ⅲ型胶原)
FUT8 Protein Human 重组人 FUT8 蛋白 (aa 68-575, His 标签)
IL17F重组大鼠 IL17F / IL-17F 蛋白 Protein
BST1 Protein Mouse 重组小鼠 CD157 / BST1 蛋白
KDR重组人 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 蛋白 Protein
人筋膜成纤维细胞大鼠白介素11(IL-11)试剂盒 ,英文名: IL-11 ELISA Kit
Mouse compleme 1 inhibitor aibody (C1INH) ELISA Kit 小鼠补体1抑制物抗体(C1INH)试剂盒
ELISA 小鼠瘦素受体(mouse Leptin receptor) 进口分装
CLIAKitforIL-27(humanIerleukin27)ELISAKit人白介素27
通用型精(arginine)含量高效液相色谱法定量试剂盒20次
ELISAKitPDGF-AB大鼠血小板衍生生长因子AB