黄绿绿僵菌说明书

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更新时间：2020-08-11

常用的冷冻保存法：

① 低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便，也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多，有些可添加保护剂。此外，也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器内，再放入低温冰箱内进行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右)：即将菌种管插入干冰内，再置于冰箱内进行冷冻保存。
③ 液氮保存法(-196℃)：是适用范围的微生物保存法。 
黄绿绿僵菌说明书培养温度：  35-37℃英文名称：Yellow Metarhizium培养保藏法:培养后于4—6℃冰箱内保存。公司专业代理ATCC菌种，质量保证，为大中型科研提供严格质量体系控制的ATCC,CMCC,CICC,DSMZ标准菌株。

实验内容：
1.称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查 
2.干热灭菌：装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物 
3.高压蒸汽灭菌：加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查 
4.过滤除菌：组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌

微生物培养方法：
1、平板划线分离法：把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环圈在平板培养基表面，通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养后生长繁殖成单菌落。
2、稀释涂布平板法将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落。
上述两种方法虽然都可以实现观察菌落特征的目的，但平板划线分离法不能对菌落计数，而稀释涂布平板法培养过程复杂，对平板的要求比较高，可参照以下步骤：
a、制备平板培养基将氯化钠蔗糖琼脂培养基加热溶化并冷却至65℃，向氯化钠蔗糖琼脂培养基中加入克林霉素溶液3～5ml并混合均匀，然后取20ml混合均匀的培养基溶液倒入培养皿，轻轻摇动培养皿，使培养基溶液均匀分布在培养皿底部，待培养基溶液凝固后即得平板培养基。
b、制备活性污泥混合液称取活性污泥土样15g，放入盛100ml无菌水并带有玻璃珠的三角烧瓶中，振摇15～20min混合均匀，用一支1ml无菌吸管从中吸取1ml土壤悬液加入盛有9ml无菌水的大试管中充分混匀，制成活性污泥混合液。
c、培养基涂布从活性污泥混合液中吸取0.2ml，滴在平板培养基表面的中央位置，用无菌玻璃涂棒将活性污泥混合液沿同心圆方向轻轻地向外扩展，使之分布均匀。

具有两大功能： 
（ 1 ）通过灌根可有效防治植物细菌性和真菌性土传病害，同时可使植物叶部的细菌和真菌病害明显减少； 
（ 2 ）对植物具有明显的促生长、增产作用。 多粘类芽孢杆菌对细菌性土传病害 ―― 植物青枯病具有很好的防治效果，在收获后期，对番茄、茄子、辣椒、烟草、马铃薯、罗汉果和生姜青枯病（姜瘟病）的田间防效可达 70 ～ -- ％，增产率达 493 ％，甚至当对照发病率高达 -- ％时防效也是如此。 多粘类 芽孢杆菌 对芋头软腐病、大白菜软腐病、辣椒 根腐病 、花卉根腐病、玉竹根腐病、沙参根腐病、番茄猝倒病、番茄立枯病以及辣椒疫病等土传 病害 也具有较好的防治作用。 此外，多粘类芽孢杆菌对 植物 具有明显的促生长作用，可使田间植株高度比空白对照区增加 10-30cm ；甚至在植物不发青枯病时，也可使植物的产量增加 27.5% ，且增产主要表现为收获前期。

兔基质金属蛋白酶-13(rabbit MMP-13)Sandwich ELISA, Double Antibody2-氨基-5-噻吩

兔基质金属蛋白酶-3(rabbit MMP-3)Sandwich ELISA, Double Antibody1-Boc-1,4-二氮杂-5-环庚酮

兔基质金属蛋白酶-9(rabbit MMP-9)Sandwich ELISA, Double Antibody羟基乙酯

兔髓过氧化物酶(rabbit MPO)Sandwich ELISA, Double Antibody4-基-2-(4-三氟基苯基)噻唑-5-羧

兔中性粒细胞弹性蛋白酶(rabbit NE)Sandwich ELISA, Double Antibody3-氨基-6-吡-2-

兔神经生长因子(rabbit NGF)Sandwich ELISA, Double Antibody4-基噻唑-5-醛

兔神经营养素3(rabbit NT-3)Sandwich ELISA, Double Antibody2,3,6-三氟苯腈

兔骨钙素(rabbit Osteocalcin)Sandwich ELISA, Double Antibody6-烟醛

兔骨保护素(rabbit OPG)Sandwich ELISA, Double Antibody6-氨基异喹啉

兔血小板活化因子(rabbit PAF)Sandwich ELISA, Double Antibody3-溴-2,6-二氟苯

兔前列腺素E2(rabbit PGE2)Sandwich ELISA, Double Antibody(R)-2-基吡咯烷盐盐

兔纤溶酶原激活剂抑制物-1 (rabbit PAI-1)Sandwich ELISA, Double Antibody6--1H-吡咯[3,2-B]并

兔妊娠相关蛋白A(rabbit PAPP-A)Sandwich ELISA, Double Antibody2,4-二氟苯腈

兔色素上皮细胞衍生因子(rabbit PEDF)Sandwich ELISA, Double Antibody4-氧基酯
黄绿绿僵菌说明书福氏志贺氏菌多价诊断血清5,5-Dimethyl-1,3-cyclohexanedione,95%

鲍氏志贺氏菌多价诊断血清4-Methyldiphenylamine,≥98.0%

O1群霍乱弧菌诊断血清(?)-10,2-Camphorsultam,≥98.0%

型脑炎灭活疫苗(+)-10,2-Camphorsultam,≥98.0%

肉抗素(R)-(+)-N-Benzyl-α-methylbenzylamine,...

脑膜炎奈瑟氏菌诊断血清3,5-Bis(trifluoromethyl)aniline,97%

型副伤寒菌诊断菌液(1R,2R)-(?)-1,2-Diaminocyclohexane,99%

变形菌OXK诊断菌液(1S,2S)-(+)-1,2-Diaminocyclohexane,≥9...

变形菌OX2诊断菌液4-Ethylaniline,≥98.0%

保存方法：
传代保存法：培养基的浓度不宜过高，营养成分不宜过于丰富，尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于适生长温度为好。若为产酸菌种，则应在培养基中添加少量碳酸钙 。
液体石蜡覆盖保存法：该法较前一种方法保存菌种的时间更长，适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。
悬液保存法：
① 蒸馏水保存法：适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌，将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。
② 糖液保存法：适用于酵母菌，如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗处保存，可长达10年。除此之外，也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。
载体保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅胶保存法；④磁珠保存法；⑤麸皮保存法；⑥纸片(滤纸)保存法。