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更新时间:2024-11-05
人脐带血造血干细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
脐带血 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 圆形 | YS-01X8301 |
细胞简介:
人脐带血造血干分离自脐带血;脐带血是胎儿娩出、脐带结扎并离断后残留在胎盘和脐带中的血液。近十几年的研究发现,脐带血中含有可以重建造血和免疫系统的造血干细胞,可用于造血干细胞移植,因此,脐带血已成为造血干细胞的重要来源。脐带血中含有大量的干细胞,干细胞是生命的种子,它会分化成机体的各种细胞,结出各种不同的果实——血液细胞、神经细胞、骨骼细胞等。干细胞是具有自我更新、高度增殖和多项分化潜能的细胞群体;这些细胞可以通过分裂维持自身细胞的特性和数量,又可进一步分化为各种组织细胞,从而在组织修复等方面发挥积极作用。造血干细胞具有自我更新能力并能分化为各种血细胞的前提细胞,终生成各种血细胞成分,包括红细胞,白细胞和血小板。造血干细胞需要根据机体的生理需求适时的补充血液系统各个成熟细胞组分。同时在损伤、炎症等应激状态下,造血干细胞也扮演着调节和维持体内血液系统各个细胞组分的生理平衡的角色。临床治疗中,造血干细胞移植广泛应用于血液系统疾病以及自身免疫疾病,在其它实体瘤的治疗中,比如淋巴瘤,生殖细胞瘤,乳腺癌,小细胞肺癌,主要应用于常规治疗失败或复发难治以及具有不良预后因素的患者。造血干细胞以不对称有丝分裂方式进行增殖,一个干细胞分裂产生两个子细胞,一个分化为造血祖细胞,另一个则保持干细胞特征。造血干细胞在不断体外培养产生大量造血祖细胞同时,保持自己既不增殖也不分化。体外培养微环境合适,造血干细胞可持续维持培养 60 天左右。 造血干细胞体外增殖培养需要基质细胞滋养(滋养层细胞),缺少滋养层细胞不增殖,无法长期培养,本产品为收集培养好的造血干悬浮细胞灌装发货,不包含滋养层,因此收货后建议尽快实验。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
实验室分离的人脐带血造血干采用采集脐带血、密度梯度离心、差速贴壁法结合培养基筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的人脐带血造血经CD34免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基:含FBS、SCF、IL-3、TPO、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:悬浮
细胞形态:圆形
传代特性:不建议传代
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
人脐带血造血干体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
兔子转化生长因子β1试剂盒 兔子转化生长因子β1试剂盒 规格型号:96T/48T 兔子转化生长因子β1试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:兔子转化生长因子β1试剂盒、兔子转化生长因子β1eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
兔子主要组织相容性复合体Ⅲ类试剂盒 兔子主要组织相容性复合体Ⅲ类试剂盒 规格型号:96T/48T 兔子主要组织相容性复合体Ⅲ类试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:兔子主要组织相容性复合体Ⅲ类试剂盒、兔子主要组织相容性复合体Ⅲ类eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
兔子坏死因子相关凋亡诱导配体3试剂盒 兔子坏死因子相关凋亡诱导配体3试剂盒 规格型号:96T/48T 兔子坏死因子相关凋亡诱导配体3试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:兔子坏死因子相关凋亡诱导配体3试剂盒、兔子坏死因子相关凋亡诱导配体3eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
人胎儿 人胎儿 规格型号:96T/48T 人胎儿,规格型号:96T/48T,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:人胎儿、人胎儿血红蛋白eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
小鼠补体片断3b(C3b)ELISA 试剂盒 96T/48T
Rat prostatic acid phosphatase (PAP) ELISA Kit 大鼠前列腺酸性0酸酶(PAP)试剂盒
HumanFMS-liketyrosinekinase3,Flt3ELISAKit 人FMS样酪激酶3(Flt3)试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanBonemorphogeneticprotein2,BMP-2试剂盒人骨成型蛋白2(BMP-2)试剂盒规格:96T/48T
植物总巯基含量比色法定量试剂盒20次
HumanSomalcellderivedfactor1β,SDF-1βELISAKit人基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)试剂盒规格:96T/48T
KLRA1(Ly-49a)抗体
顺氯氨铂耐药相关蛋白9抗体
IL22RA1重组狗 IL22RA1 / IL22R 蛋白 (Fc 标签) Protein
NKG2D(natural killer cell group 2D 0.5mgNKG2D(natural killer cell group 2D) NK细胞受体/自然杀伤细胞活化性受体
WFIKKN2重组人 WFIKKN2 / GASP-1 蛋白 Protein
FUOM Protein Human 重组人 FUOM / Fucose mutarotase / FucM / C10orf125 蛋白
CNTN1 Protein Mouse 重组小鼠 Contactin 1 / CNTN1 蛋白
NKG2D(natural killer cell group 2D 0.5mgNKG2D(natural killer cell group 2D) NK细胞受体/自然杀伤细胞活化性受体
FUOM Protein Human 重组人 FUOM / Fucose mutarotase / FucM / C10orf125 蛋白
IL22RA1重组狗 IL22RA1 / IL22R 蛋白 (Fc 标签) Protein
CNTN1 Protein Mouse 重组小鼠 Contactin 1 / CNTN1 蛋白
WFIKKN2重组人 WFIKKN2 / GASP-1 蛋白 Protein
人脐带血造血干细胞大鼠白蛋白(albumin)试剂盒 ,英文名: albumin ELISA Kit
Mouse compleme 4 (C4) ELISA Kit 小鼠补体蛋白4(C4)试剂盒
ELISA 小鼠MCP-3(mouse MCP-3) 进口分装
CLIAKitforIL-21ELISAKit大鼠白介素21
通用型科萨基病毒A(CoxsackievirusA)定量PCR扩增试剂盒20次
ELISAKitPAF大鼠血小板活化因子