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更新时间:2024-11-05
兔骨髓单个核细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
骨髓 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 圆形 | YS-01X8355 |
细胞简介:
兔骨髓单个核分离自骨髓;骨髓是机体的造血组织,位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种:红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用,白细胞能杀灭与抑制各种病原体,包括细菌、病毒等;某些淋巴细胞能制造抗体。因此,骨髓不但是造血器官,它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨质间的网眼中,是一种海绵状的组织,能产生血细胞的骨髓略呈红色,称为红骨髓。出生时,红骨髓充满全身骨髓腔,随着年龄增大,脂肪细胞增多,相当部分红骨髓被黄骨髓取代,后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。骨髓单个核细胞是骨髓中具有单个核的细胞,包括淋巴细胞和单核细胞。注意这里是(mononuclear cell)单个核细胞,而不是(Monocyte)单核细胞。单个核细胞的体积、形态和比重与骨髓其他细胞不同,利用一定比例聚蔗糖和钠形成的等渗溶液作密度梯度离心,使一定密度的细胞按相应密度梯度分布,可将各种血细胞与单个核细胞分离。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
实验室分离的兔骨髓单个核采用取骨髓、通过密度梯度离心法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的兔骨髓单个核经过检测,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:半贴壁半悬浮
细胞形态:圆形
传代特性:不增殖;不传代
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
兔骨髓单个核体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
小鼠受体()ELISAKit ELISA
小鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISAKit ELISA
小鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISAKit ELISA
小鼠β内啡肽(β-EP)ELISAKit ELISA
EB病毒核抗原-3A抗体
谷受体亚基δ2/GluR-δ2抗体
PLAT重组小鼠 tPA / PLAT 蛋白 (Fc 标签) Protein
蛋白Z(PROZ)重组蛋白 Recombinant Protein Z (PROZ)
EPDR1重组人 EPDR1 蛋白 Protein
COQ7 Protein Human 重组人 COQ7 蛋白
IL6 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 / 恒河猴 IL6 / Interleukin-6 蛋白
ABCA1(ATP binding cassette transporter A1 0.5mgABCA1(ATP binding cassette transporter A1) 腺苷三0酸结合盒转运体A1抗原
COQ7 Protein Human 重组人 COQ7 蛋白
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GDNF Protein Rat 重组大鼠 GDNF 蛋白
PDGFRA重组人 PDGFRa / CD140a 蛋白 (His & GST 标签) Protein
小鼠乳铁传递蛋白/乳铁蛋白(LF/LTF)ELISA pcr检测试剂盒
Human visceral adipose specific serine protease inhibitor (vaspin) ELISA Kit 人内脏脂肪特异性丝蛋白酶抑制剂(vaspin)试剂盒
Humanpan-cytokeratin,P-CKELISAKit 人广谱细胞角蛋白(P-CK)pcr检测试剂盒分装
GuineapigGrowthhormone,GH试剂盒豚鼠生长激素(GH)试剂盒规格:96T/48T
真菌/酵母酸性0酸酶总活性比色法定量试剂盒20次
Mousec-fosELISAKit小鼠c-fos试剂盒规格:96T/48T
兔骨髓单个核细胞大鼠皮敌菌素(DCD)试剂盒 ,英文名: DCD ELISA Kit
Mouse thrombus precursor protein (TpP) ELISA Kit 小鼠血栓前体蛋白(TpP)试剂盒
Rat5-Hydroxyyptamine,5HTELISAKit 大鼠5羟色胺(5-HT)pcr检测试剂盒分装
CLIAKitforGp49a(Humanglycoprotein49A)ELISAKit人糖蛋白49A
细胞丁酰酯酶活性比色法定量试剂盒20次
Ratthyroopin-releasinghormone,HELISAKit大鼠促甲状腺素释放激素(H)试剂盒规格:96T/48T