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基础信息Product information
产品名称：
兔角膜成纤维细胞
产品简介：
兔角膜成纤维细胞公司正在出售的产品：MS4A4E蛋白抗体 乳腺癌抵抗标记蛋白1抗体 NCI-H1930人小细胞肺癌 核受体蛋白NR2E3抗体 HDLM-2人霍奇金淋巴瘤细胞 原钙粘蛋白γC5抗体 RKN人卵巢癌细胞 大鼠肺动脉成纤维细胞
产品型号：
厂商性质：经销商
访问量：611
更新时间：2024-11-05
产品特性Product characteristics
兔角膜成纤维细胞
商品属性：
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
眼角膜 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 成纤维细胞样 | YS-01X8375 |
细胞简介：
兔角膜成纤维分离自眼角膜组织；角膜位于眼球前壁的一层透明膜，约占纤维膜的前1/6，从后面看角膜呈正圆形，从前面看为横椭圆形。角膜厚度各部分不尽相同，中央部薄。角膜有十分敏感的神经末梢，如有外物接触角膜，眼睑便会不由自主地合上以保护眼睛。为了保持透明，角膜并没有血管，透过外界空气、泪液及房水获取养份及氧气。角膜分为五层，由前向后依次为：上皮细胞层、前弹力层、基质层、后弹力层、内皮细胞层。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的角膜成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。角膜成纤维细胞在生理条件下的主要功能包括：构造和维持角膜的正常形态，合成和释放细胞外基质以及组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。
方法简介：
实验室分离的兔角膜成纤维采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测：
实验室分离的兔角膜成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息：
培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：成纤维细胞样
传代特性：可传5代左右；3代以内状态佳
消化液：0.25%
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
兔角膜成纤维体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞传代及冻存：
| 细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
| 如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种：
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品：
猪血管生成素2(ANG-2)试剂盒 组装/原装
猪血管生成素1(ANG-1)试剂盒 组装/原装
猪血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)试剂盒 组装/原装
猪血管内皮细胞生长因子A（VEGF-A）试剂盒 组装/原装
G蛋白信号转导调节因子8抗体
微管蛋白聚合促进蛋白24
VTN重组小鼠 Vitronectin / VTN 蛋白 (His 标签) Protein
Ag-ARC(ARG3.1/ARC, Activity-regulated cytoskeleton-associated protein 0.5mgAg-ARC(ARG3.1/ARC, Activity-regulated cytoskeleton-associated protein) ARC(多肽抗原)
TLR4重组人 TLR4 / CD284 蛋白 (His 标签) Protein
BCL2L2 Prote僀Ꝙ僀
Ag-ARC(ARG3.1/ARC, Activity-regulated cytoskeleton-associated protein 0.5mgAg-ARC(ARG3.1/ARC, Activity-regulated cytoskeleton-associated protein) ARC(多肽抗原)
BCL2L2 Protein Human 重组人 BCL-W / BCL2L2 蛋白 (His 标签)
VTN重组小鼠 Vitronectin / VTN 蛋白 (His 标签) Protein
ERBB3 Protein Rat 重组大鼠 HER3 / ErbB3 蛋白
TLR4重组人 TLR4 / CD284 蛋白 (His 标签) Protein
猪细胞色素氧化酶(CC0)试剂盒
Human maix metalloproteinase 3 (MMP-3) ELISA Kit 人基质金属蛋白酶3(MMP-3)试剂盒
RabbitBcl-2AssaciatedXprotein,BAXELISAKit 兔Bcl-2相关X蛋白(BAX)试剂盒分装
CLIAKitforai-CMVIgG(Humanai-cytomegalovirusIgGaibody,ai-CMVIgG)ELISAKit人抗巨细胞病毒抗体IgG
血液α-活性CNPG3比色法定量试剂盒50次
PorcineHeatShockProtein20,HSP-20ELISAKit猪热休克蛋白20(HSP-20)试剂盒
兔角膜成纤维细胞大鼠环0腺苷(cAMP)试剂盒 ，英文名： cAMP ELISA Kit
Rabbit maix metalloproteinase 1 (MMP-1) ELISA Kit 兔基质金属蛋白酶1(MMP-1)试剂盒
脑膜奈瑟菌W135群(NM- W135)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
CLIAKitforMouseLactateDehydrogenase,LDHELISAKit小鼠乳酸脱氢酶
体液过氧化氢(HYDROGENPEROXIDE)活性荧光定量试剂盒20次
ELISAKit2,3-dinor-TXB2人2,3Dinor血栓烷B2
原代细胞的培养条件：
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗，以尽量除去消化液的毒性；
2、细胞接种时浓度要稍大一些，至少为5×108细胞/L；
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养；
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养；
6、在起始的2天中尽量减少振荡，以防止刚贴壁的细胞发生脱落，漂浮；
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状，应将原代细胞换液；
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时，应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞；
2、短期培养，可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行；
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内，进行分瓶试验；
4、长期培养时，淋巴细胞中要加入生长因子，白血病细胞中要加入少量的原患者血清，以利细胞生长；
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次；
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行
