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更新时间:2024-11-05
兔脑静脉血管平滑肌细胞
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
脑静脉 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 成纤维细胞样 | YS-01X8397 |
细胞简介:
兔脑静脉血管平滑肌分离自脑静脉组织;与脑动脉相比,脑静脉管壁较薄。与身体其他部位的静脉不同,脑静脉管壁中没有静脉瓣,静脉血的回流依赖高位的势能。脑静脉血的回流路径可以归纳为:大部脑静脉血经脑深部静脉和脑血窦流入颈内静脉;小部脑静脉血经眼部翼状静脉丛,进入静脉导血管再到头皮,后流入椎管中的椎旁静脉系统。脑静脉系统有大量交通枝静脉丛,即使两侧颈内静脉都被阻塞,大脑静脉血仍可经椎静脉和颈外静脉系统完成其回流。脑静脉平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介:
实验室分离的兔脑静脉平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的兔脑静脉血管平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传5代左右;3代以内状态佳
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
兔脑静脉血管平滑肌体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
小鼠α半乳糖基抗原试剂盒 小鼠α半乳糖基抗原试剂盒 小鼠α半乳糖基抗原试剂盒,,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠α半乳糖基抗原试剂盒、小鼠α半乳糖基抗原eisa试剂盒
小鼠αN已酰基葡糖苷酶试剂盒 小鼠αN已酰基葡糖苷酶试剂盒 小鼠αN已酰基葡糖苷酶试剂盒,,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠αN已酰基葡糖苷酶试剂盒、小鼠αN已酰基葡糖苷酶eisa试剂盒
小鼠αL岩藻糖苷酶试剂盒 小鼠αL岩藻糖苷酶试剂盒 小鼠αL岩藻糖苷酶试剂盒,,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠αL岩藻糖苷酶试剂盒、小鼠αL岩藻糖苷酶eisa试剂盒
小鼠αL艾杜糖苷酸酶试剂盒 小鼠αL艾杜糖苷酸酶试剂盒 小鼠αL艾杜糖苷酸酶试剂盒,,来源:试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠αL艾杜糖苷酸酶试剂盒、小鼠αL艾杜糖苷酸酶eisa试剂盒
CD31单克隆抗体(工作液)
神经丛蛋白B1抗体
EPHA7重组小鼠 EphA7 / EHK-3 蛋白 Protein
Annexin V 膜粘连蛋白-5(抗原 0.5mgAnnexin V 膜粘连蛋白-5(抗原)
CLPS重组人 CLPS / Colipase 蛋白 Protein
FABP2 Protein Human 重组人 FABP2 / I-FABP 蛋白
REG1A Protein Rat 重组大鼠 REG1A / PSPS 蛋白 (Fc 标签)
Annexin V 膜粘连蛋白-5(抗原 0.5mgAnnexin V 膜粘连蛋白-5(抗原)
FABP2 Protein Human 重组人 FABP2 / I-FABP 蛋白
EPHA7重组小鼠 EphA7 / EHK-3 蛋白 Protein
REG1A Protein Rat 重组大鼠 REG1A / PSPS 蛋白 (Fc 标签)
CLPS重组人 CLPS / Colipase 蛋白 Protein
小鼠过氧化物酶体增殖因子活化受体γ( PPAR-γ)ELISA pcr检测试剂盒
Rat immunoglobulin A (IgA) ELISA Kit 大鼠免疫球蛋白A(IgA)试剂盒
humanProstaglandinE1,PG-E1ELISAKit 人前列腺素E1(PGE1)pcr检测试剂盒分装
Humanai-parotidductaibody试剂盒人抗腮腺管抗体(ai-parotidductAb)试剂盒规格:96T/48T
植物细胞壁束缚酸性蔗糖转化酶(acidinvease)活性比色法定量试剂盒(胞壁)20次
Humayrosinekinasewithimmunoglobulin-likeandEGF-likedomains1,Tie1ELISAKit人血管生成素受体/含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪激酶1(Tie1)试剂盒规格:96T/48T
兔脑静脉血管平滑肌细胞大鼠肌原纤蛋白1(FBN1)试剂盒 ,英文名: FBN1 ELISA Kit
Mouse histone deacetylase (HD) ELISA Kit 小鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)试剂盒
RatBonemorphogeneticprotein6,BMP-6ELISAKit 大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)pcr检测试剂盒分装
CLIAKitforFXELISAKit大鼠Ⅹ
细胞精(arginine)含量高效液相色谱法定量试剂盒20次
Ratmonocytechemotacticprotein3,MCP-3ELISAKit大鼠单核细胞趋化蛋白3(MCP-3/CCL7)试剂盒规格:96T/48T