小鼠外周血树突状细胞(DC细胞)

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更新时间：2024-11-04

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产品名称：小鼠外周血树突状细胞(DC细胞)

组织来源：外周血

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 半贴半悬浮

细胞形态 树突状

传代特性 属于高度分化细胞；属于不增殖细胞群

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞简介：

小鼠外周血DC分离自外周血，由外周血单核细胞诱导而成的；外周血是除骨髓之外的血液，临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中，再在从血液中提取分离得到造血干细胞，我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞，在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中提出外周血这一新概念。DC细胞，全称树突状细胞(DC)，是近年来倍受们关注的专职抗原呈递细胞(APC)，能摄取、加工及呈递抗原，启动T细胞介导的免疫反应。由美国学者Steinman于1973年在淋巴结中发现，从脾脏中分离出一类与粒细胞、巨噬细胞和淋巴细胞形态和功都不同的白细胞，因其细胞膜向外伸出，形成与神经细胞轴突相似的膜性树状突起，故而命名为树突状细胞。未成熟DC具有较强的迁移能力，成熟DC能有效激活初始型T细胞，处于启动、调控、并维持免疫应答的中心环节。

方法简介：

公司实验室分离的小鼠外周血DC采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞、培养过程添加细胞因子诱导而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的小鼠外周血树突状(DC细胞)经CD86免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养步骤：

一、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

二、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

a）、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞，脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。

b）、对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心8-10分钟，弃上清液，补加1-2ml培养液后吹匀，将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。

方法二：可选择半数换液方式，弃半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的产品：

小鼠组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)试剂盒   96T/48T

小鼠组织多肽抗原(TPA)试剂盒   96T/48T

小鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)试剂盒   96T/48T

小鼠组织蛋白酶K(cath-K)试剂盒   96T/48T

小鼠胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat cholesterol ester ansfer protein (CETP) ELISA Kit 大鼠酯转移蛋白(CETP)试剂盒

HumanBromodeoxyuridine,BrdUELISAKit 人溴脱氧核苷尿(BrdU)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitfor17-OHP(Mouse17-Hydroxyprogesterone)ELISAKit小鼠17羟孕同

饮料环(cyclamate)含量高效液相色谱法定量试剂盒20次

Mouselipoproteinlipase,LPLELISAKit小鼠脂蛋白脂酶(LPL)试剂盒规格：96T/48T

1号染色体开放阅读框141抗体

Synaptophysin单克隆抗体

HA重组甲型流感 H5N1 (A/Hong kong/213/03) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (28 Ser/Trp, His 标签) Protein

SARS putative orflab polyprotein (SARS coronavirus CUHK-W1 0.5mgSARS putative orflab polyprotein (SARS coronavirus CUHK-W1)(抗原)

S100A9重组人 S100A9 / CAGB / p14 蛋白 Protein

CD1B & B2M Protein Human 重组人 CD1B & B2M Heterodimer 蛋白

IL18BP Protein Human 重组人 IL18BPa 蛋白 (His & Fc 标签)

SARS putative orflab polyprotein (SARS coronavirus CUHK-W1 0.5mgSARS putative orflab polyprotein (SARS coronavirus CUHK-W1)(抗原)

CD1B & B2M Protein Human 重组人 CD1B & B2M Heterodimer 蛋白

HA重组甲型流感 H5N1 (A/Hong kong/213/03) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (28 Ser/Trp, His 标签) Protein

IL18BP Protein Human 重组人 IL18BPa 蛋白 (His & Fc 标签)

S100A9重组人 S100A9 / CAGB / p14 蛋白 Protein

小鼠外周血树突状细胞(DC细胞)大鼠抵抗素(Resistin)试剂盒 ，英文名： Resistin ELISA Kit

Porcine iercellular adhesion molecule 3 (ICAM-3/CD50) ELISA Kit 猪细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)试剂盒

番茄特定基因序列(PG)核酸试剂盒 48T

CLIAKitforL-Selectin/CD62LELISAKit大鼠L选择素

通用HRP酶联检测封闭溶液100毫升

ELISAKitsEPCR鸡可溶性血管内皮细胞蛋白C受体

收到细胞如何处理？

1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。

2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。

3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。

4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。

5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。

6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作