鹿源性成分（Deer）核酸检测试剂盒说明书

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更新时间：2021-06-17

服务流程：
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤 
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）    1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR实验步骤：
①取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其*溶解。

②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA，混匀后15到30℃孵育10分钟后，于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混匀后，4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时，先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其*溶解，获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后，读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，测定RNA溶液 浓度和纯度。

人二氢嘧啶酶样2(DPYSL2)酶联免疫吸附测定试剂盒  Human DPYSL2 (Dihydropyrimidinase Like Protein 2) ELISA Kit

人二氢嘧啶酶样蛋白3(DPYSL3)酶联免疫吸附测定试剂盒  Human DPYSL3 (Dihydropyrimidinase Like Protein 3) ELISA Kit

人神经纤维网蛋白1(NRP1)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human NRP1 (Neuropilin 1) ELISA Kit

人发动蛋白1(DNM1)酶联免疫吸附测定试剂盒  Human DNM1 (Dynamin 1) ELISA Kit

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人法尼基二法尼基转移酶1(FDFT1)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human fFDFT1 (Farnesyl Diphosphate Farnesyltransferase 1) ELISA Kit

人反三碘甲状腺原氨酸(rT3)酶联免疫吸附测定试剂盒  Human rT3 (Reverse Triiodothyronine) ELISA Kit

人泛素蛋白(Ub)酶联免疫吸附测定试剂盒  Human Ub (Ubiquitin) ELISA Kit

人泛素蛋白D(UBD)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human UBD (Ubiquitin D) ELISA Kit

人泛素分解酶(DUB)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human DUB (Deubiquitinating Enzyme) ELISA Kit

人泛素激活酶样蛋白(UBE1L)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human UBE1L (Ubiquitin Activating Enzyme E1 Like Protein) ELISA Kit

人泛素结合酶E2C(UBE2C)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human UBE2C (Ubiquitin Conjugating Enzyme E2C) ELISA Kit

人泛素连接酶E3A (UBE3A)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human UBE3A (Ubiquitin Protein Ligase E3A) ELISA Kit

人非神经元性烯醇化酶(NNE)酶联免疫吸附测定试剂盒  Human NNE (Non-Neuronal Enolase) ELISA Kit

人多配体聚糖3(SDC3)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human SDC3 (Syndecan 3) ELISA Kit

人类胰蛋白酶(TPS)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human TPS (Tryptase) ELISA Kit

鹿源性成分(Deer)核酸检测试剂盒说明书9H-Carbazole ethanol 9-咔唑乙醇 1g  瓶

2×Taq Plus PCR MasterMix (含染料) 1ml  支

特级马血清 200ml  瓶

anti-HIS Tag Rabbit Polyclonal antibody 100ul  瓶

Recombinant Human Insulin 重组胰岛素 20mg  瓶

猪外周血淋巴细胞分离液试剂盒 200ml/KIT  盒

Avidin-FITC 0.5ml  支

Telmisartan 替米沙坦 144701-48-4  100mg

Bouin's固定液 100ml  瓶

羊抗C3 （免疫血清） 0.5ml  支

Tetrodotoxin 毒素 4368-28-9  1mg

RNase A溶液 (10mg/ml) 1ml  瓶

 SULT2A1 基因全长ORF克隆

小鼠 UMOD 基因全长ORF克隆

重组 CXCL10 / Crg-2 蛋白

 ISX 基因全长ORF克隆

 APOL1 / apolipoprotein L1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

小鼠 EPHB1 / EPHT2 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 BRF1 基因全长ORF克隆

大鼠 PDGFRB 基因全长ORF克隆

 SERPINB3 基因全长ORF克隆

 PKC delta / PRKCD 基因全长ORF克隆

重组小鼠 TNF-alpha / TNFA 蛋白

 WNT10A 基因全长ORF克隆

使用方法：
一、样品采集：
1、食品样品：样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照菌检验要求进行。
2、血液样品：用无菌注射器抽取受检者静脉血2mL，注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管，立即混匀。
3、粪便样品：取粪便置于灭菌的收集管中送检。
4、病灶部位样品：取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
一、稀释 PCR 阳性对照（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）
1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用
6. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

8.公司产品仅用于科研。