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基础信息Product information
产品名称:

C型产气荚膜杆菌(CP-C)核酸检测试剂盒

产品简介:

C型产气荚膜杆菌(CP-C)核酸检测试剂盒保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

产品型号:

厂商性质:经销商

访问量:35

更新时间:2021-06-17

产品特性Product characteristics

服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

产品名称

规格

货号

C型产气荚膜杆菌(CP-C)核酸检测试剂盒

50T

HE61505-R


实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤 
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR实验步骤:
①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。

②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其完全溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。

直接蓝6(标准品) DIRECT BLUE 6 2602-46-2 质量规格:分析标准品  EGFP标记二抗(抗;抗兔;抗小鼠;抗大鼠) 进口/国产 规格:100微升

分散橙37(标准品) Disperse Orange 37 13301-61-6 质量规格:分析标准品  GST(抗;抗兔;抗小鼠;抗大鼠) 进口/国产 规格:100微升

二乙基锡(标准品) Diethyltin-dichloride 866-55-7 质量规格:分析标准品,10ng/μl溶于环己烷  HA(抗;抗兔;抗小鼠;抗大鼠) 进口/国产 规格:100微升

草萘胺(标准品) Napropamid 15299-99-7 质量规格:分析标准品  FLAG(抗;抗兔;抗小鼠;抗大鼠) 进口/国产 规格:100微升

除虫脲标准溶液(10μg/ml,u=3%) Diflubenzuron solution 35367-38-5 质量规格:10μg/ml,u=3%  P53(抗;抗兔;抗小鼠;抗大鼠) 进口/国产 规格:100微升

二噻农(标准品) Dithianon 3347-22-6 质量规格:分析标准品  HIS(抗;抗兔;抗小鼠;抗大鼠) 进口/国产 规格:100微升

棉隆(标准品) Dazomet 533-74-4 质量规格:分析标准品,97%  ACTIN(抗;抗兔;抗小鼠;抗大鼠) 进口/国产 规格:100微升

双氯酚(标准品) Dichlorophene 97-23-4 质量规格:分析标准品  GPDGP(抗;抗兔;抗小鼠;抗大鼠) 进口/国产 规格:100微升

异丙净(标准品) Dipropetryn 4147-51-7 质量规格:分析标准品  APC(抗;抗兔;抗小鼠;抗大鼠) 进口/国产 规格:100微克

异菌脲标准溶液(100μg/ml,u=4%) [3-(3,5-Dichlorophenyl)-2,4-dioxoimidazolidinyl]-N-(methylethyl)carboxamide standard solution 36734-19-7 质量规格:100μg/ml,u=4%  CDK2(抗;抗兔;抗小鼠;抗大鼠) 进口/国产 规格:100微克

异氯(标准品) Dicapthon 2463-84-5 质量规格:分析标准品  CDK3(抗;抗兔;抗小鼠;抗大鼠) 进口/国产 规格:100微克

4,4'-滴滴滴(标准品)  p, p’-DDD 72-54-8 质量规格:分析标准品  CDK4(抗;抗兔;抗小鼠;抗大鼠) 进口/国产 规格:100微克

p, p’-DDE(标准品) p, p’-DDE 72-55-9 质量规格:分析标准品  CDK6(抗;抗兔;抗小鼠;抗大鼠) 进口/国产 规格:100微克

p, p’-DDE标准溶液(100μg/ml,u=3%) p, p’-DDE solution 72-55-9 质量规格:100μg/ml,u=3%  P16(抗;抗兔;抗小鼠;抗大鼠) 进口/国产 规格:100微克

C型产气荚膜杆菌(CP-C)核酸检测试剂盒Hymecromone(7-Hydroxy-4-methylcoumarin) 4-甲伞形酮 90-33-5  20mg

Troxerutin 曲克芦丁 7085-55-4  100mg

L-Tyrosine L-酪氨酸 60-18-4  200mg

Geraniin 老鹳草素 60976-49-0  20mg

CollagenaseⅢ 胶原酶Ⅲ 100mg  支

Bruceine D 鸦胆子素D 21499-66-1  20mg

Syringin 紫丁香酚苷-刺五加苷B 118-34-3  20mg

Erythritol 赤藓糖醇 149-32-6  20mg

PectolyaseY-23 果胶酶Y-23 100mg  瓶

Columbamine 非洲防己碱 3621-36-1  20mg

Cyanidin-3-O-Arabinoside 矢车菊素-3-O-阿拉伯糖苷 111613-04-8  1mg

Astragaline 紫云英苷 480-10-4  20mg

 PROCR 基因全长ORF克隆

 ANGPTL7 基因全长ORF克隆

小鼠 IL18BP 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

大鼠 TLR10 基因全长ORF克隆

 APOC3 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签

 HER3 / ErbB3 ELISA配对抗体

小鼠 RPL7A 基因全长ORF克隆

小鼠 LYVE-1 基因全长ORF克隆

 VSIG4 基因全长ORF克隆

 GIF 基因全长ORF克隆

重组 FGF21 蛋白 (His 标签)

 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 ELISA配对抗体

使用方法:
一、样品采集:
1、食品样品:样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照菌检验要求进行。
2、血液样品:用无菌注射器抽取受检者静脉血2mL,注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管,立即混匀。
3、粪便样品:取粪便置于灭菌的收集管中送检。
4、病灶部位样品:取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
一、稀释 PCR 阳性对照(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)
1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用
6. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

8.公司产品仅用于科研。

 

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