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产品型号:
厂商性质:经销商
访问量:286
更新时间:2021-06-17
使用方法:
一、样品采集:
1、食品样品:样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照菌检验要求进行。
2、血液样品:用无菌注射器抽取受检者静脉血2mL,注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管,立即混匀。
3、粪便样品:取粪便置于灭菌的收集管中送检。
4、病灶部位样品:取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
一、稀释 PCR 阳性对照(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)
1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用
6. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
8.公司产品仅用于科研。
服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
产品名称 | 规格 | 货号 |
产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)核酸检测试剂盒 | 50T | HE61540-R |
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR实验步骤:
①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其*溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其*溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。
O-(2,3,4,5,6-五氟苄基)羟胺盐酸盐(>98.0%(HPLC)(N)) O-(2,3,4,5,6-Pentafluorobenzyl)hydroxylamine Hydrochloride 57981-02-9 质量规格:>98.0%(HPLC)(N) 组织钠离子(Na)浓度化学比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
壬烷(>99.5%(GC),标准物) Nonane 111-84-2 质量规格:>99.5%(GC),标准物质 血液钠离子(Na)浓度化学比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
二十烷(>99.5%(GC),标准物) Eicosane 112-95-8 质量规格:>99.5%(GC),标准物质 体液钠离子(Na)浓度化学比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
二十一烷(>99.0%(GC),标准物质) Heneicosane 629-94-7 质量规格:>99.0%(GC),标准物质 环境钠离子(Na)浓度化学比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
二十二烷(>99.0%(GC),标准物质) Docosane 629-97-0 质量规格:>99.0%(GC),标准物质 食物钠离子(Na)浓度化学比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
二十三烷(>99.0%(GC),标准物质) Tricosane 638-67-5 质量规格:>99.0%(GC),标准物质 饮料钠离子(Na)浓度化学比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
二十四烷(>99.0%(GC),标准物质) Tetracosane 646-31-1 质量规格:>99.0%(GC),标准物质 细菌钠离子(Na)浓度化学比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
二十五烷(>99.0%(GC),标准物质) Pentacosane 629-99-2 质量规格:>99.0%(GC),标准物质 酵母钠离子(Na)浓度化学比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
正辛酸酯(>99.5%(GC),标准物质) Methyl n-Octanoate 111-11-5 质量规格:>99.5%(GC),标准物质 细胞钠离子(Na)浓度荧光定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
壬酸酯(>99.5%(GC),标准物质) Methyl Nonanoate 1731-84-6 质量规格:>99.5%(GC),标准物质 组织钠离子(Na)浓度荧光定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
月桂酸酯(>99.5%(GC),标准物质) Methyl Laurate 111-82-0 质量规格:>99.5%(GC),标准物质 锌(Zn)定量检测试剂盒 进口/国产 规格:50次
肉豆蔻酸酯(>99.5%(GC),标准物质) Methyl Myristate 124-10-7 质量规格:>99.5%(GC),标准物质 氯(Cl)定量检测试剂盒 进口/国产 规格:50次
硬脂酸酯(>99.5%(GC),标准物质) Methyl Stearate 112-61-8 质量规格:>99.5%(GC),标准物质 血液钙(Ca)定量检测试剂盒 进口/国产 规格:50次
亚麻酸酯(>98.0%(GC),标准物质) Methyl Linolenate 301-00-8 质量规格:>98.0%(GC),标准物质 血液镁离子(Mg)浓度化学比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:50次
产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)核酸检测试剂盒Oxytetracycline 土霉素 79-57-2 100mg
Deoxyshikonin 去氧紫草素 43043-74-9 20mg
透析袋 扁宽32 截留分子量15000 0.5m/即用型 管
Baicalin 黄芩苷 21967-41-9 10mg
植物基因组DNA提取试剂盒 100T 盒
Propyl gallate 没食子酸丙酯 500g 瓶
D-β-Tocotrienol D-β-生育三烯酚 490-23-3 30mg
Collgen TypeⅠ 胶原蛋白Ⅰ型(可溶) 1g 瓶
无粉胶手套 小号 盒
L-Cystine L-胱氨酸 56-89-3 200mg
Ajugol 益母草苷 52949-83-4 20mg
Vanillin 香草醛 25g 瓶
GNAT1 基因全长ORF克隆
重组甲型流感 H3N2 神经氨酸酶 (Neuraminidase / NA) (N294S mutation) (高活性)
P4HB / DSI 基因全长ORF克隆
食蟹猴 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
CPE 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠 CDH16 基因全长ORF克隆
NAE1 基因全长ORF克隆
DBH 基因全长ORF克隆
EFNA1 / Ephrin-A1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
USP8 基因全长ORF克隆
Carbonic Anhydrase IV / CA4 CHO细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
小鼠 TH / Tyrosine Hydroxylase 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)