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基础信息Product information
产品名称:

致病性大肠杆菌(EPEC)核酸检测试剂盒

产品简介:

致病性大肠杆菌(EPEC)核酸检测试剂盒保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

产品型号:

厂商性质:经销商

访问量:37

更新时间:2021-06-17

产品特性Product characteristics

PCR实验步骤:
①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。

②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其完全溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。

服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

产品名称

规格

货号

致病性大肠杆菌(EPEC)核酸检测试剂盒

50T

HE61509-R

实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤 
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。

使用方法:
一、样品采集:
1、食品样品:样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照菌检验要求进行。
2、血液样品:用无菌注射器抽取受检者静脉血2mL,注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管,立即混匀。
3、粪便样品:取粪便置于灭菌的收集管中送检。
4、病灶部位样品:取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
一、稀释 PCR 阳性对照(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)
1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用
6. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

8.公司产品仅用于科研。

Big CHAP(>98%,BR) Big CHAP 86303-22-2 质量规格:>98%,BR  细胞/组织线粒体RNA分离试剂盒 进口/国产 规格:10次

C12E8 10%溶液 C12E8 3055-98-9 质量规格:BR  TRIZOL试剂 进口/国产 规格:100毫升

氟化钙(>98%,BR) Calcium floride 7789-75-5 质量规格:>98%,BR  DNA清除试剂盒 进口/国产 规格:20次

硬脂酸钙 Calcium stearate 1592-23-0 质量规格:BR  桌面DNA清除溶液 进口/国产 规格:500毫升

香柏油 Cedar wood oil 8000-27-9 质量规格:商品级  DEPC水 进口/国产 规格:500毫升

硫酸铈八水(>97%,BR) Cerium(III) sulfate, octahydrate 13454-94-9 质量规格:>97%,BR  DMDC水 进口/国产 规格:500毫升

三氧化二铬(>99%,BR) Chromium (III) oxide 1308-38-9 质量规格:>99%,BR  DEPC处理试剂盒 进口/国产 规格:100次

四氧化三钴(>99%,BR) Cobalt (II, III ) oxide 1308-06-1 质量规格:>99%,BR  DMDC处理试剂盒 进口/国产 规格:100次

乙酸钴四水(>99.5%,BR) Cobaltous acetate, tetrahydrate 6147-53-1 质量规格:>99.5%,BR  RNA样品储存液 进口/国产 规格:50毫升

钴粉(>99%,BR) Cobaltous powder 7440-48-4 质量规格:>99%,BR  纯化RNA样品储存液 进口/国产 规格:50毫升

铜粉(>99.5%,BR) Copper powder 7440-50-8 质量规格:>99.5%,BR  mRNA纯化树脂再生试剂盒 进口/国产 规格:20次

碱式碳酸铜(铜纯度:52.5~56.5%) Copper(II) carbonate basic 12069-69-1 质量规格:纯度(铜):52.5~56.5%  RNA比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次

氧化铜粉(>99%,BR) Copper(II) oxide 1317-38-0 质量规格:>99%,BR  RNA荧光(RiboGreen)定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次

焦铜 Copper(II) pyrophosphate 10102-90-6 质量规格:(Cu):36.0~38.0%,Tech Grade  两步法RT-PCR试剂盒 进口/国产 规格:20/50次

致病性大肠杆菌(EPEC)核酸检测试剂盒透析袋 扁宽38 截留分子量1000 0.5m/即用型  管

Lactic acid DL-酸 50-21-5  20mg

3-氨丙基三乙氧基硅烷 100ml  瓶

Ibuprofen 布洛芬 15687-27-1  100mg

Adenosine 5'-monophosphate 5'-腺嘌呤核苷酸 1g  瓶

anti-GFP Tag Mouse Monoclonal antibody 100ul  瓶

24孔培养板 100块/箱  块

Adenosine 3',5'-cyclophosphate 环酸腺苷 60-92-4  50mg

6-Aminocaproic acid 6-氨基正己酸 100g  瓶

4-Hydroxyisoleucine 4-羟基异亮氨酸 55399-93-4  20mg

GoldView Ⅱ型核酸染色剂(5000×) 0.5ml  瓶

硝基化四氮唑蓝(INT ) 250mg  瓶

食蟹猴 IL6ST / gp130 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 CLEC10A 转录变体2 基因全长ORF克隆

大鼠 IL12B 基因全长ORF克隆

 BAALC 基因全长ORF克隆

 SGCA 基因全长ORF克隆

小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 ELISA配对抗体

甲型流感 H1N1 (猪流感 2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) ELISA配对抗体

 POU5F1 基因全长ORF克隆

中东呼吸综合征毒 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragment (aa 383-502) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

小鼠 SMPD1 基因全长ORF克隆

大鼠 MGAT4A 基因全长ORF克隆

 CHMP4B 基因全长ORF克隆

 

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