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基础信息Product information
产品名称:

猫源性成分(Feline)核酸检测试剂盒

产品简介:

猫源性成分(Feline)核酸检测试剂盒保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

产品型号:

厂商性质:经销商

访问量:38

更新时间:2021-06-17

产品特性Product characteristics

使用方法:
一、样品采集:
1、食品样品:样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照菌检验要求进行。
2、血液样品:用无菌注射器抽取受检者静脉血2mL,注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管,立即混匀。
3、粪便样品:取粪便置于灭菌的收集管中送检。
4、病灶部位样品:取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
一、稀释 PCR 阳性对照(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)
1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用
6. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

8.公司产品仅用于科研。

服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

产品名称

规格

货号

猫源性成分(Feline)核酸检测试剂盒

50T

HE61617-R


实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤 
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR实验步骤:
①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。

②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其完全溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。

人骨桥素(OPN)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human OPN (Osteopontin) ELISA Kit

人骨髓前体抑制因子1(MPIF-1/CCL23)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human MPIF-1/CCL23 (Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 1) ELISA Kit

人性别决定区Y框蛋白9(SOX9)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human SOX9 (Sex Determining Region Y Box Protein 9) ELISA Kit

人骨形态形成蛋白拮抗蛋白1(GREM1)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human GREM1 (Gremlin 1) ELISA Kit

人骨粘连蛋白(ON)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human ON (Osteonectin) ELISA Kit

人固醇类生成因子1(SF1)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human SF1 (Steroidogenic Factor 1) ELISA Kit

人相关血浆蛋白2(PAPPA2)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human PAPPA2 (Pappalysin 2) ELISA Kit

人免疫球蛋白A (IgA)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human IgA (Immumoglobulin A) ELISA Kit

人广谱细胞角蛋白(P-CK)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human P-CK (Pan-Cytokeratin) ELISA Kit

人果糖二醛缩酶C(ALDOC)酶联免疫吸附测定试剂盒  Human ALDOC (Aldolase C, Fructose Bisphosphate) ELISA Kit

人过氧化物酶体膜蛋白3(PMP3)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human PMP3 (Peroxisomal Membrane Protein 3) ELISA Kit

人过氧化物酶体增殖激活物受体γ辅激活因子1α(PPARγC1α)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human PPARγC1α (Peroxisome Proliferator Activated Receptor Gamma Coactivator 1 Alpha) ELISA Kit

人过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human PPAR-α (Peroxisome Proliferator Activated Receptor Alpha) ELISA Kit

人过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human PPAR-γ (Peroxisome Proliferator Activated Receptor Gamma) ELISA Kit

人乳过氧化物酶(LPO)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human LPO (Lactoperoxidase) ELISA Kit

人核RNA输出因子1(NXF1)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human NXF1 (Nuclear RNA Export Factor 1) ELISA Kit

猫源性成分(Feline)核酸检测试剂盒(2-(1-Ethoxyethoxy)ethyl)benzene 风信子素 239881  20mg

中性红染色液(0.33% 过滤除菌,活细胞染色) 100ml  瓶

Ninhydrin hydrate 水合茚三酮 5g  瓶

OLIGOMYCIN 寡霉素 5mg  瓶

Metaphosphoric acid 偏酸 100g  瓶

PVDF膜(0.45um) 26.5cm×3.75m 26.5×3.75  卷

5-Ethynyl-2'-deoxyuridine 5-乙炔基-2-脱氧尿苷 50mg  瓶

Sepharose 6B 琼脂糖凝胶6B 100ml  瓶

HPD750大孔吸附树脂 500g  瓶

Cellulase R-10 纤维素酶R-10 1g  瓶

Bis-Tris 5g  瓶

Sulfamethoxazole-SMZ 磺胺甲恶唑 723-46-6  100mg

重组小鼠 PIGF / PLGF 蛋白

 HOXA10 基因全长ORF克隆

食蟹猴 IL18R1 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 TNFRSF10A / CD261 / APO2 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 CEACAM8 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签

 vimentin 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签

小鼠 IL16 基因全长ORF克隆

 CA II 基因全长ORF克隆

 NR1D1 基因全长ORF克隆

 FANCA / FACA 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

小鼠 AGRP 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

重组 FES Kinase / Feline sarcoma oncogene 蛋白 (His & GST 标签)

 

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