欢迎访问上海研生实业有限公司网站

返回首页|联系我们

全国统一服务热线:

15201736385
产品中心您当前的位置:首页 > 产品中心 > 核酸检测试剂盒 > 荧光PCR法 > 48T/96T新孢子虫(Ne)核酸检测试剂盒说明书
基础信息Product information
产品名称:

新孢子虫(Ne)核酸检测试剂盒说明书

产品简介:

新孢子虫(Ne)核酸检测试剂盒说明书保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

产品型号:48T/96T

厂商性质:经销商

访问量:36

更新时间:2021-06-17

产品特性Product characteristics

服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

产品名称

规格

货号

新孢子虫(Ne)核酸检测试剂盒说明书

50T

HE61430-R


实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤 
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR实验步骤:
①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。

②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其完全溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。

十二烯基丁二酸酐(>98%,BR) DDSA, dodecenylsuccinic anhydrous 25377-73-5 质量规格:>98%,BR  载玻片细胞组蛋白H3-K4基化荧光显微镜检测试剂盒 (针对一基) 进口/国产 规格:10/20次

癸二酸(>96%,BR) Decanedioic acid 111-20-6 质量规格:>96%,BR  载玻片细胞组蛋白H3-K4基化荧光显微镜检测试剂盒 (针对二基、基) 进口/国产 规格:10/20次

脱氢乙酸(>98%,BR) Dehydroacetic acid 520-45-6 质量规格:>98%,BR  冰冻切片组织组蛋白H3-K4基化荧光显微镜检测试剂盒 进口/国产 规格:10/20次

脱羰秋水仙碱 Demecolcine 477-30-5 质量规格:>98%,进分  石蜡切片组织组蛋白H3-K4基化荧光显微镜检测试剂盒 进口/国产 规格:10/20次

DON毒素,呕吐毒素;脱氧雪腐镰刀菌烯醇(>98%(HPLC),BR) Deoxynivalenol 51481-10-8 质量规格:>98%(HPLC),BR   载玻片细胞组蛋白H3-K4基化NBT显色光学显微镜检测试剂盒 进口/国产 规格:10/20次

第威德合金 Devarda's alloy 2246186 质量规格:工业级   冰冻切片组织组蛋白H3-K4基化NBT显色光学显微镜检测试剂盒 进口/国产 规格:10/20次

二乙酰一肟(>98%,BR) Diacetyl monoxime 57-71-6 质量规格:>98%,BR   石蜡切片组织组蛋白H3-K4基化NBT显色光学显微镜检测试剂盒 进口/国产 规格:10/20次

马来酸二乙酯(>98%,BR) Diethyl maleate 141-05-9 质量规格:>98%,BR   细胞组蛋白H3-K4基化比色法定量检测试剂盒 (针对一基) 进口/国产 规格:20次

二氢细胞松弛素(>98%,BR) Dihydrocytochalasin B 39156-67-7 质量规格:>98%,BR   细胞组蛋白H3-K4基化比色法定量检测试剂盒(针对二基、基) 进口/国产 规格:20次

二异辛胺(>98%,BR) Diisooctylamine 106-20-7 质量规格:>98%,BR   细胞组蛋白H3-K4基化荧光定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20 次

马来酸二酯(>98%,BR) Dimethyl maleate 624-48-6 质量规格:>98%,BR    组蛋白H3-K4基化西方杂交分析试剂盒 进口/国产 规格:5次

丁二酸二酯(>99%,BR) Dimethyl succinate 106-65-0 质量规格:>99%,BR   组蛋白H3-K4基化免疫共沉淀分析试剂盒 进口/国产 规格:5次

二基酮钠盐(>97%,BR) Dimethylglyoxime sodium salt 75006-64-3 质量规格:>97%,BR   细胞/组织裂解悬液、血液、体液等组蛋白H3-K4基化ELISA定量检测试剂盒 进口/国产 规格:24/48/96次

直接蓝71(≥50%,BR) Direct blue 71 4399-55-7 质量规格:≥50%,BR   细胞组蛋白H3-K9基化流式细胞仪检测试剂盒 进口/国产 规格:10/20次

新孢子虫(Ne)核酸检测试剂盒说明书Fructose 果糖 7660-25-5  20mg

Muscone 麝香酮 541-91-3  0.15mL

大龙移液器 100-1000ul  支

Formononetin 芒柄花黄素 485-72-3  20mg

Elacridar 依克立达 10mg  瓶

Polygalaxanthone III 远志山酮III 162857-78-5  20mg

Coumalic Acid 豆酸 500-05-0  20mg

Hyperoside 金丝桃苷 482-36-0  20mg

Combretastatin A-4 康普瑞汀 117048-59-6  20mg

HPD500大孔吸附树脂 500g  瓶

Sudan ⅢⅢ 85-86-9  20mg

Lycopene 番茄红素 502-65-8  20mg

 ARF4 基因全长ORF克隆

 MVP 基因全长ORF克隆

雪貂 CD8A / CD8 alpha chain 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 CXADR / CAR 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 EIF2B4 基因全长ORF克隆

 MYB 转录变体2 基因全长ORF克隆

 SELM 基因全长ORF克隆

 ELK3 基因全长ORF克隆

 SLC1A3 基因全长ORF克隆

 IL17A 基因全长ORF克隆

 EIF2AK2 / PKR 基因全长ORF克隆

 GTF2A1 基因全长ORF克隆

使用方法:
一、样品采集:
1、食品样品:样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照菌检验要求进行。
2、血液样品:用无菌注射器抽取受检者静脉血2mL,注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管,立即混匀。
3、粪便样品:取粪便置于灭菌的收集管中送检。
4、病灶部位样品:取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
一、稀释 PCR 阳性对照(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)
1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用
6. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

8.公司产品仅用于科研。

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7

上一篇:鸭源性成分Co1基因(Duck-Co1)检测试剂盒

下一篇:血液基因组柱式中量提取试剂盒

在线客服 联系方式 二维码

服务热线

021-59989018

扫一扫,关注我们