鸭源性成分Co1基因（Duck-Co1）检测试剂盒

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更新时间：2021-06-17

服务流程：
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤 
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）    1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR实验步骤：
①取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其完全溶解。

②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA，混匀后15到30℃孵育10分钟后，于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混匀后，4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时，先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其完全溶解，获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后，读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，测定RNA溶液 浓度和纯度。

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人角膜锁链蛋白(CDSN)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human CDSN (Corneodesmosin) ELISA Kit

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人接触蛋白2(CNTN2)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human CNTN2 (Contactin 2) ELISA Kit

人接触蛋白3(CNTN3)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human CNTN3 (Contactin 3) ELISA Kit

人接触蛋白4(CNTN4)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human CNTN4 (Contactin 4) ELISA Kit

人接触蛋白相关蛋白1(CNTNAP1)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human CNTNAP1 (Contactin Associated Protein 1) ELISA Kit

人接触蛋白相关蛋白样蛋白4(CNTNAP4)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human CNTNAP4 (Contactin Associated Protein 4) ELISA Kit

鸭源性成分Co1基因(Duck-Co1)检测试剂盒进口蓝盖试剂瓶 500ml  个

Methyl eugenol 甲丁香酚 93-15-2  20mg

β-Estradiol β- 雌二醇 1g  瓶

Cy7-N-羟基琥珀酰亚胺酯 1 mg  支

麦迪康  50只/盒 蓝色  盒

Sucralose 三蔗糖 56038-13-2  20mg

Biodyne尼龙转印B膜正电6,6 0.45um 30cm×3m  卷

Cytidine 胞苷 65-46-3  20mg

5-Fluorocytosine 5-氟胞嘧啶 25g  瓶

96孔培养板 100块/箱  块

硅胶板G 10×20CM 10片/盒  盒

Hydroxytyrosol 羟基酪醇 10597-60-1  20mg

甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/1934) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 EphB6 ELISA配对抗体

 IL17RD ELISA配对抗体

小鼠 NEK3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 CXCL9 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签

 SMPD1 / ASM 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 NTN4 / Netrin-4 基因全长ORF克隆

小鼠 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

大鼠 CYB5A 基因全长ORF克隆

 TNFRSF10A / CD261 / APO2 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

 TNFSF10 / TRAIL 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带His标签

 VWC2 / Brorin 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)

使用方法：
一、样品采集：
1、食品样品：样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照菌检验要求进行。
2、血液样品：用无菌注射器抽取受检者静脉血2mL，注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管，立即混匀。
3、粪便样品：取粪便置于灭菌的收集管中送检。
4、病灶部位样品：取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
一、稀释 PCR 阳性对照（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）
1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用
6. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

8.公司产品仅用于科研。