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厂商性质:经销商
访问量:96
更新时间:2021-06-17
使用方法:
一、样品采集:
1、食品样品:样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照菌检验要求进行。
2、血液样品:用无菌注射器抽取受检者静脉血2mL,注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管,立即混匀。
3、粪便样品:取粪便置于灭菌的收集管中送检。
4、病灶部位样品:取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
一、稀释 PCR 阳性对照(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)
1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用
6. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
8.公司产品仅用于科研。
服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
产品名称 | 规格 | 货号 |
艰难梭菌(TCD-A)核酸检测试剂盒价格 | 50T | HE61523-R |
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR实验步骤:
①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其完全溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。
L-羟基脯氨酸 L-Hydroxyproline 51-35-4 质量规格:>99%,BR 组织NADPH氧化酶活性化学发光法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次(10样本)
L-正亮氨酸 L-Norleucine 327-57-1 质量规格:>98%,BR 细胞NADPH氧化酶活性比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次(10样本)
Fmoc-D-4-碘丙氨酸 Fmoc-4-iodo-D-Phe-OH 205526-29-0 质量规格:HPLC>98% 组织NADPH氧化酶活性比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20/50次(10样本)
3,5-二碘-L-酪氨酸 3,5-Diiodo-L-tyrosine 300-39-0 质量规格:BR,98% 细胞过氧化物酶(peroxidase)活性比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
L-焦谷氨酸;氧脯氨酸 H-Pyr-OH 98-79-3 质量规格:>98%,BR 组织过氧化物酶(peroxidase)活性比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
CBZ-L-焦谷氨酸 Z-Pyr-OH 32159-21-0 质量规格:>98%,BR 血液过氧化物酶(peroxidase)活性比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
DL-m-酪氨酸 DL-m-Tyrosine 775-06-4 质量规格:0.98 真菌/酵母过氧化物酶(peroxidase)活性比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
肌氨酸酯盐酸盐 H-Sar-OMe·HCl 13515-93-0 质量规格:BR,98% 植物过氧化物酶(peroxidase)活性比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
L-异亮氨醇 L-Isoleucinol 24629-25-2 质量规格:>97%,BR 植物NADPH氧化酶活性比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次(10样本)
L-亮氨醇 L-Leucinol 7533-40-6 质量规格:>97%,油状 酵母NADPH氧化酶活性比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次(10样本)
N-Boc-L-亮氨醇 Boc-Leucinol 82010-31-9 质量规格:>98%,BR 真菌NADPH氧化酶活性比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次(10样本)
L-丙氨醇 L-Phenylalaninol 3182-95-4 质量规格:>98%,BR 细胞半胱氨酸蛋白酶-1(CASPASE-1)活性比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
L-色氨醇 L-Tryptophanol 2899-29-8 质量规格:0.97 组织半胱氨酸蛋白酶-1(CASPASE-1)活性比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
Fmoc-缬氨醇 Fmoc-Valinol 160885-98-3 质量规格:>98.5%,BR 细胞半胱氨酸蛋白酶-1(CASPASE-1)活性荧光定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次
艰难梭菌(TCD-A)核酸检测试剂盒价格兔抗羊IgG-RBITC 0.5ml 支
Laccase 漆酶 1g 瓶
Schisantherin A 五味子酯甲 58546-56-8 20mg
Dodecyl β-D-maltopyranoside 十二烷基-β-D-麦芽糖苷 250mg 瓶
质粒提取试剂盒 100T 盒
RNase A (牛胰) 25mg 瓶
羊抗猪IgG 1mg 支
Glycine 甘氨酸 100g 瓶
Atractylodin 苍术素 55290-63-6 20mg
Chloroquine diphosphate salt 喹啉二酸盐 25g 瓶
羊抗马IgG-FITC 0.5ml 支
Kinetin 激动素(进口) 250mg 支
小鼠 Vitronectin / VTN 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
SerpinC1 基因全长ORF克隆
DEFB121 基因全长ORF克隆
PLSCR4 基因全长ORF克隆
CLIC4 基因全长ORF克隆
GLIS1 基因全长ORF克隆
BOLA2 基因全长ORF克隆
PPIB / CYPB 细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
大鼠 H2AFZ 基因全长ORF克隆
大鼠 SFN 基因全长ORF克隆
MAGOHB 基因全长ORF克隆
COL4A3BP 基因全长ORF克隆