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产品中心您当前的位置:首页 > 产品中心 > 核酸检测试剂盒 > 荧光PCR法 > 50T金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)核酸检测试剂盒
基础信息Product information
产品名称:

金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)核酸检测试剂盒

产品简介:

金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)核酸检测试剂盒保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

产品型号:50T

厂商性质:经销商

访问量:177

更新时间:2021-06-11

产品特性Product characteristics

PCR实验步骤:
①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其*溶解。

②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其*溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。

服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

产品名称

规格

货号

金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)核酸检测试剂盒

50T

HE60815-R


实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤 
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。

使用方法:
一、样品采集:
1、食品样品:样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照菌检验要求进行。
2、血液样品:用无菌注射器抽取受检者静脉血2mL,注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管,立即混匀。
3、粪便样品:取粪便置于灭菌的收集管中送检。
4、病灶部位样品:取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
一、稀释 PCR 阳性对照(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)
1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用
6. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

8.公司产品仅用于科研。

复壁碳纳米管 40-60nm(直径),1-2μm(长度) Carbon Nanotube Multi-walled 40-60nm(diam.), 1-2µm(length) 308068-56-6 质量规格:>95%(TPO Method)  饮料阿斯巴塘(aspartame)含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次

复壁碳纳米管 60-100nm(直径),5-15μm(长度) Carbon Nanotube Multi-walled 60-100nm(diam.), 5-15µm(length) 308068-56-6 质量规格:>95%(TPO Method)  糖果阿斯巴塘(aspartame)含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次

3,5-二苄氧基苄溴(>98.0%(GC)(T)) 3,5-Dibenzyloxybenzyl Bromide 24131-32-6 质量规格:>98.0%(GC)(T)  食物阿斯巴塘(aspartame)含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次

3,5-双[3,5-双(苄氧基)苄氧基]苄溴(>97.0%(HPLC)) 3,5-Bis[3,5-bis(benzyloxy)benzyloxy]benzyl Bromide 129536-41-0 质量规格:>97.0%(HPLC)  药品阿斯巴塘(aspartame)含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次

3,5-双(3,5-二氧基苄氧基)苄醇(>94.0%(GC)) 3,5-Bis(3,5-dimethoxybenzyloxy)benzyl Alcohol 176650-92-3 质量规格:>94.0%(GC)  化妆品阿斯巴塘(aspartame)含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次

3,5-双(3,5-二氧基苄氧基)苄溴(>97.0%(HPLC)(T)) 3,5-Bis(3,5-dimethoxybenzyloxy)benzyl Bromide 176650-93-4 质量规格:>97.0%(HPLC)(T)  咖啡阿斯巴塘(aspartame)含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次

3,5-双[3,5-双(3,5-二氧基苄氧基)苄氧基]苄溴(>97.0%(T)) 3,5-Bis[3,5-bis(3,5-dimethoxybenzyloxy)benzyloxy]benzyl Bromide 152811-37-5 质量规格:>97.0%(T)  饮料阿斯巴塘(aspartame)含量薄层色谱法定性检测试剂盒 进口/国产 规格:20次

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3',5'-二羟基乙酮(>98.0%(GC)) 3',5'-Dihydroxyacetophenone 51863-60-6 质量规格:>98.0%(GC)  食物阿斯巴塘(aspartame)含量薄层色谱法定性检测试剂盒 进口/国产 规格:20次

3',5'-苄氧基乙酮(>97.0%(GC)) 3',5'-Dibenzyloxyacetophenone 28924-21-2 质量规格:>97.0%(GC)  药品阿斯巴塘(aspartame)含量薄层色谱法定性检测试剂盒 进口/国产 规格:20次

3,5-二氧基苄醇(>98.0%(GC)) 3,5-Dimethoxybenzyl Alcohol 705-76-0 质量规格:>98.0%(GC)  化妆品阿斯巴塘(aspartame)含量薄层色谱法定性检测试剂盒 进口/国产 规格:20次

3,5-二氧基苄溴(>96.0%(GC)) 3,5-Dimethoxybenzyl Bromide 877-88-3 质量规格:>96.0%(GC)  咖啡阿斯巴塘(aspartame)含量薄层色谱法定性检测试剂盒 进口/国产 规格:20次

3,5-二溴-1-基硅基(>97.0%(GC)) 3,5-Dibromo-1-trimethylsilylbenzene 17878-23-8 质量规格:>97.0%(GC)  饮料阿斯巴塘(aspartame)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次

3',5'-二溴-4'-羟基乙酮(>97.0%(GC)) 3',5'-Dibromo-4'-hydroxyacetophenone 2887-72-1 质量规格:>97.0%(GC)  糖果阿斯巴塘(aspartame)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次

金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)核酸检测试剂盒肌腱蛋白R(TN-R)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒  INS-1(大鼠胰岛细胞瘤细胞)5×106cells/瓶×2

病蛋白(nephrin)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒  IR983F(大鼠骨髓瘤细胞)5×106cells/瓶×2

兔子可溶性P选择素(sP-selectin)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒  Ishikawa(内膜癌细胞)5×106cells/瓶×2

小鼠透明质酸结合蛋白(HABP)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒  Ishikawa, 内膜癌细胞系

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猴子热休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒  IV型胶原酶(含10mL酶解缓冲液)1mL

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磷酯酶Cγ链(PLCγ1)ELISA 试剂盒96T/48T试剂盒  J774A.1(小鼠单核巨噬细胞)5×106cells/瓶×2

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小鼠角化细胞生长因子(KGF)ELISA试剂盒96T/48T试剂盒  JAR(胎盘绒毛膜癌细胞)5×106cells/瓶×2

 

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